PFGE和质粒图谱分析人和猪来源德尔卑沙门菌多重耐药株的同源性

发布时间：2018-06-21 01:21

  本文选题：德尔卑沙门菌 + 脉冲凝胶电泳　； 参考：《中国抗生素杂志》2014年10期

【摘要】：目的分析人和猪来源的德尔卑沙门菌的分子同源性,为研究多重耐药性在人畜之间传播提供分子生物学技术依据。方法药敏试验检测人和猪来源的德尔卑沙门菌多重耐药株对10种抗菌药物的敏感性;用脉冲凝胶电泳方法(PFGE)检测菌株间的分子同源性;结合实验或电转移试验获得目标质粒,质粒酶切图谱检测质粒的同源性。PCR分析染色体介导喹诺酮耐药基因gyr A和par C,质粒可介导的喹诺酮耐药基因qnr A/qnr B/qnr C/qnr S、aac(6′)-Ⅰb-cr、qep A和oqx AB。结果共收集48株德尔卑沙门菌,经药敏试验筛选获得11株多重耐药株(MDR),人源性8株,猪源性3株。11株菌除对氨苄青霉素、氯霉素、链霉素、磺胺和四环素(R型:ACSSu T)耐药外,所有菌株也对萘啶酸和环丙沙星耐药,6株对左氧氟沙星耐药,5株对头孢曲松耐药。PFGE分析,11株菌共分为6个克隆,3株动物源性菌株与8株人源性菌株无克隆相关性。喹诺酮耐药基因分析显示,有5株和3株动物源株检测到gyr A的Ser83Leu或/和Asp87Asn突变,6株人源株和3株动物源株检测到par C的Ser80Ile或/和Thr57Ser突变。质粒电泳分析显示,所有菌株都存在1-4条质粒条带,大小介于2~180kb,其中3株人源性菌株和1株动物源性株都存在4kb左右大小的质粒;2株动物源性菌株仅存在20 kb大小质粒。用结合实验和电转移方法,分析4kb质粒结构,证实4个质粒的酶切图谱完全一致,质粒中均存在介导外排基因oqx AB和喹诺酮耐药基因aac(6′)-Ⅰb-cr。结论人和猪来源的德尔卑沙门菌多重耐药株中质粒介导的外排基因oqx AB和喹诺酮耐药基因aac(6′)-Ⅰb-c是喹诺酮重要的耐药机制,可能在沙门菌间传递,导致对喹诺酮类高耐药性。通过人和猪的接触或间接途径,沙门菌有传播喹诺酮耐药性的风险,同一种质粒可在人和动物中转移而传播该耐药机制。
[Abstract]:Objective to analyze the molecular homology of Salmonella delpeiensis from human and pig, and to provide molecular biological basis for studying the transmission of multidrug resistance between human and animal. Methods the susceptibility of human and porcine multidrug resistant strains to 10 antimicrobial agents was detected by drug sensitivity test, molecular homology was detected by pulsed gel electrophoresis (PGE) method, and target plasmids were obtained by combination of experiments or electrical transfer tests. The homology of plasmids was detected by restriction endonuclease mapping. PCR was used to analyze the chromosome-mediated quinolone-resistant genes gyr A and par C, and the plasmid mediated quinolone-resistant genes qnr A/qnr Br / Qnr C / Qnr Sapaacti-鈪，

本文编号：2046531