转录因子Bach1对人微血管内皮细胞的作用研究
本文选题:转录因子Bach + 人微血管内皮细胞 ; 参考:《中国病理生理杂志》2014年12期
【摘要】:目的:研究转录因子Bach1对人微血管内皮细胞功能的影响。方法:利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)细胞转染技术下调内皮细胞Bach1表达;用Matrigel管腔形成实验检测内皮细胞体外血管新生的能力;用Transwell小室法检测细胞迁移;用CCK-8法测定细胞增殖;用实时荧光定量PCR、Western blotting和ELISA法检测细胞中血红素氧合酶1(heme oxygenase 1,HO-1)和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA和蛋白的表达情况;用转染报告基因的方法检测VEGF基因的转录活性。结果:下调内皮细胞Bach1表达明显促进人微血管内皮细胞迁移和管腔形成能力,对内皮细胞增殖能力无明显影响;抑制Bach1表达促进内皮细胞HO-1 mRNA和蛋白的表达,增加VEGF转录活性及mRNA和蛋白的表达。结论:抑制转录因子Bach1表达可增加内皮细胞HO-1和VEGF的表达,促进人微血管内皮细胞迁移和管腔形成,提示Bach1是负性调控血管新生的因子。
[Abstract]:Objective: to study the effect of transcription factor Bach1 on the function of human microvascular endothelial cells (MECs). Methods: the expression of Bach1 in endothelial cells was down-regulated by transfection of small interfering (small interfering RNA-siRNA, the ability of endothelial cell angiogenesis in vitro was detected by Matrigel lumen formation assay, cell migration was detected by Transwell chamber assay, cell proliferation was measured by CCK-8 method. The mRNA and protein expression of heme oxygenase-1 (heme oxygenase 1) and vascular endothelial growth factor (vascular endothelial growth) were detected by real-time fluorescence quantitative blotting and Elisa, and the transcriptional activity of VEGF gene was detected by transfection of reporter gene. Results: down-regulation of Bach1 expression significantly promoted migration and lumen formation of human microvascular endothelial cells, but had no effect on proliferation of endothelial cells, inhibition of Bach1 expression promoted the expression of HO-1 mRNA and protein in endothelial cells. VEGF transcription activity and mRNA and protein expression were increased. Conclusion: inhibiting the expression of transcription factor Bach1 can increase the expression of HO-1 and VEGF in endothelial cells and promote the migration and lumen formation of human microvascular endothelial cells, suggesting that Bach1 is a negative regulation factor for angiogenesis.
【作者单位】: 复旦大学基础医学院生理与病理生理学系;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(No.81170298;No.81270410) 国家基础科学人才培养基金资助项目(No.J1210041) 上海市卫生局科研项目(No.c106629)
【分类号】:R363.2
【参考文献】
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【共引文献】
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