ArgT蛋白与福氏2a痢疾杆菌毒力相关性的研究

发布时间：2018-06-28 07:02

  本文选题：福氏2a痢疾杆菌 + ArgT　； 参考：《郑州大学》2005年硕士论文

【摘要】：福氏2a痢疾杆菌在37℃条件下具有毒力,而在30℃时不具有毒力,原因是其丧失了侵袭力,有研究表明福氏2a痢疾杆菌在30℃条件下高表达ArgT蛋白,而在37℃条件下表达量很低,ArgT蛋白的低温诱导表达未有相关报道,这意味着研究ArgT的高表达与2457T在低温时没有毒力的关系既有意义,同时又富于挑战性。 目的: 研究赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸结合蛋白(ArgT蛋白)与痢疾杆菌毒力的相关性;探讨ArgT蛋白在低温时高表达可能的机制以及在痢疾杆菌生长过程中的作用。 方法: 一、福氏2a痢疾杆菌2457T argT基因插入突变体的构建 1.同源序列的克隆:选定argT基因中间一段约440bp的序列作为进行同源重组的同源序列,定义为argTI,将PCR扩增的argTI产物与pMD18-T克隆载体连接,将重组子转化入DH5α感受态中,用蓝白斑法筛选阳性克隆。用BamHⅠ和SalⅠ酶切重组质粒pMDargTI,得到同源序列argTI。2.重组质粒pXLargTI的构建:将argTI与同样经BamHⅠ和SalⅠ酶切过的自杀质粒pXL275进行连接,电击转化S_(17-1)λpir感受态,用氯霉素和链霉素双抗平板筛选阳性克隆pXLargTI。3.细菌固相交配:将2457T野生株(受体菌)和含有pXLargTI的S_(17-1)λpir按1:1混合涂无抗性LB平板,37℃培养5h后用新鲜液体LB洗下菌体,依次稀释10倍、
[Abstract]:Shigella flexneri 2a is virulent at 37 鈩，

本文编号：2077158