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EAMG模型大鼠的实验研究

发布时间:2018-07-15 16:28
【摘要】:目的:从美国加利福尼亚电鳐的电器官中提取纯化乙酰胆碱受体(AchR),主动免疫Lewis大鼠,复制实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物模型。方法:参照国内外文献,利用免疫亲和层析技术提取纯化AchR,采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测蛋白纯度,观察免疫后大鼠每日表现,并于初次免疫后第4周、第8周作肌电图,实验结束时取血清,检测乙酰胆碱受体抗体AchR-ab,最后处死大鼠,电镜观察神经肌肉接头。结果:模型组大鼠在初次免疫注射后的第17天开始相继出现肌无力症状,并有三只迅速恶化,一周内死亡。模型组其它发病大鼠经肌电图证实,衰退程度均大于15%,而佐剂组与正常组大鼠均无表现。模型组AchR-ab高于佐剂组与正常组值,P0.05。电镜观察模型组神经肌肉接头处(NMJ)突触前后膜有改变。 结论:从美国加利福尼亚电鳐的电器官中提取纯化乙酰胆碱受体,主动免疫Lewis大鼠,成功复制出EAMG模型,为中药治疗重症肌无力的研究提供了理想的动物模型。
[Abstract]:Aim: to extract and purify acetylcholine receptor (AchR) from electric organ of Torpedo California USA and immunize Lewis rats actively to make experimental autoimmune myasthenia gravis (EAMG) animal model. Methods: AchR was extracted and purified by immunoaffinity chromatography with reference to literature at home and abroad. The protein purity was measured by SDS polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The daily performance of the rats was observed and electromyography was performed at the 4th week and the 8th week after the first immunization. At the end of the experiment, the serum was taken and the acetylcholine receptor antibody AchR-ab. the rats were killed and the neuromuscular junctions were observed by electron microscope. Results: in the model group, myasthenia began to appear on the 17th day after the first immunization, and three rats deteriorated rapidly and died within one week. The other rats in the model group were confirmed by electromyography that the degree of decline was greater than that of the control group, while that of the adjuvant group and the normal group was not. The value of AchR-ab in model group was higher than that in adjuvant group and normal group (P 0.05). The changes of presynaptic membrane at the neuromuscular junction (NMJ) in the model group were observed by electron microscope. Conclusion: isolated and purified acetylcholine receptor from electric organ of Torpedo California USA and immunized Lewis rats successfully to replicate EAMG model which provides an ideal animal model for the treatment of myasthenia gravis with traditional Chinese medicine.
【学位授予单位】:辽宁中医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R-332

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