小鼠胚胎干细胞钙敏感受体的表达和其对细胞增殖的影响

发布时间：2018-08-07 21:58

【摘要】：目的:观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)在小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)的功能性表达。方法:(1)采用Western blotting技术及免疫荧光染色分析CaSR蛋白在129小鼠ESD3细胞系的表达;采用激光共聚焦扫描技术检测不同处理因素(包括G蛋白-PLC-IP3通路)对细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响;应用MTT法和流式细胞术分析CaSR活化对mESCs增殖的影响。结果:CaSR蛋白在mESCs有表达;增加细胞外钙或者给予CaSR激动剂新霉素均可引起[Ca2+]i和CaSR表达增加;CaSR活化可增加mESCs的存活率和磷酸化ERK2蛋白的表达。NPS2390(CaSR抑制剂)则能减弱这种作用。结论:CaSR在mESCs有表达;CaSR的活化参与了mESCs的增殖。
[Abstract]:Aim: to investigate the functional expression of calcium-sensing receptor CaSR in (mouse embryonic stem cells of mouse embryonic stem cells. Methods: (1) the expression of CaSR protein in 129-mouse ESD3 cell line was analyzed by Western blotting technique and immunofluorescence staining, and the effect of different treatment factors (including G protein-PLC-IP3 pathway) on intracellular calcium concentration ([Ca2] I) was detected by confocal laser scanning. The effects of CaSR activation on the proliferation of mESCs were analyzed by MTT and flow cytometry. [Ca2] I and CaSR expression could be increased by increasing extracellular calcium or CaSR agonist neomycin, which could increase the survival rate of mESCs and the expression of phosphorylated ERK2 protein. NPS2390 (CaSR inhibitor) could attenuate this effect. Conclusion the activation of CaSR in mESCs may play an important role in the proliferation of mESCs.
【作者单位】： 牡丹江医学院;哈尔滨医科大学病理生理教研室;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81300163) 牡丹江医学院科学技术研究项目(No.IS201308)
【分类号】：R363

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2171471