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HSV-I ICP22对HCMV主要即刻早期启动子结构的效应分析

发布时间:2018-09-10 13:09
【摘要】: 人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)和单纯疱疹病毒(Herpes simplexvirus,HSV)是同属于疱疹病毒科、具有复杂结构的DNA病毒,其所引起的病毒性疾病具有重要的流行病学意义。同时,由于这类病毒的基因组具有类似于真核细胞的复杂基因结构,因而在真核基因表达调控机理的分子生物学研究和应用工作中表现出重要的意义。 人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)主要即刻早期(MajorImmediate-Early,,MIE)启动子在HCMV基因表达调控中起重要作用,并且具有很强的转录启动能力,其顺式调控元件在这一区域形成多次重复的特殊结构,而这些元件及其组合方式在转录启动过程中的生物学意义尚不清楚。实验发现HSV-Ⅰ即刻早期蛋白ICP22能对多种病毒及细胞启动子及增强子发挥极强的转录抑制作用,但是作为HSV其中一个立即早期蛋白,人们对它的了解相对于其它四个立即早期蛋白还相对较少。因此,本实验的研究重点是探讨HSV-1病毒立即早期基因ICP22对各种真核基因启动子的抑制作用,并同时利用其对强启动子HCMV的主要即刻早期(Major Immediate-Early,MIE)的结构进行分析。 实验利用CAT(氯霉素乙酰转移酶)报告基因系统检测ICP22对各种不同的HCMV即刻早期基因启动子结构元件及突变体转录活性的影响,结果显示:尽管各种元件在ICP22存在的情况下表现出了各自独特的转录效应,但它们组合后形成的不同突变体以及完整的HCMV MIE启动子所表现的转录效率又不是这些元件功能的简单叠加,并且其特定的组合方式能够拮抗ICP22的作用。
[Abstract]:Human cytomegalovirus (Human cytomegalovirus,HCMV) and herpes simplex virus (Herpes simplexvirus,HSV) belong to the family Herpesviridae with complex structure of DNA virus. At the same time, because the genome of this kind of virus has complex gene structure similar to that of eukaryotic cells, it is of great significance in the research and application of molecular biology of eukaryotic gene expression regulation mechanism. Human cytomegalovirus (Human cytomegalovirus,HCMV) main immediate early (MajorImmediate-Early,MIE) promoter plays an important role in the regulation of HCMV gene expression and has a strong transcriptional priming ability. The biological significance of these elements and their combinations in the process of transcriptional initiation is unclear. It was found that HSV- I immediate early protein ICP22 could inhibit transcription of many viruses and cell promoters and enhancers, but it was one of the immediate early proteins in HSV. It is less well known than the other four immediate early proteins. Therefore, the emphasis of this study is to investigate the inhibitory effect of HSV-1 virus immediate early gene ICP22 on various eukaryotic gene promoters, and to analyze the structure of the main immediate early stage (Major Immediate-Early,MIE) of strong promoter HCMV at the same time. CAT (chloramphenicol acetyltransferase) reporter gene system was used to detect the effect of ICP22 on the transcriptional activity of various HCMV instant early gene promoter elements and mutants. The results showed that, despite the unique transcriptional effects of various elements in the presence of ICP22, However, the transcriptional efficiency of the different mutants and complete HCMV MIE promoters formed by their combinations is not a simple superposition of the functions of these elements, and their specific combinations can antagonize the role of ICP22.
【学位授予单位】:中国协和医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R373

【共引文献】

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本文编号:2234538

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