人源化抗CD20单克隆抗体的理化性质及结晶条件的筛选
[Abstract]:Objective to analyze the physicochemical properties of humanized anti-CD20 monoclonal antibody and to screen its crystallization conditions. Methods the purity of antibody was detected by reductive, non-reduced SDS-PAGE and high performance liquid phase exclusion chromatography (size exclusive chromatography-HPLC,SEC-HPLC), the relative molecular weight of light and light chain of antibody was determined by reductive SDSPAGE, the isoelectric point of antibody was determined by capillary electrophoresis. High performance liquid phase cation exchange chromatography (ion exchange chromatographyHPLC,IEC-HPLC) was used to detect the charge heterogeneity of antibody, and the crystallization conditions of antibody were preliminarily screened by suspension gas phase diffusion method. Results the purity of non-reducing SDS-PAGE of humanized monoclonal antibody against CD20 was 100, the purity of reductive SDS-PAGE (light chain heavy chain) was 100, the relative molecular weight of heavy chain and light chain was 58 000 and 27 000 respectively, the purity of SFC-HPLC was 99.2, the isoelectric point was 9.2, the surface charge distribution of antibody was uniform. The obtained protein crystal is twinned with a resolution of about 8 A. Conclusion the purity of the antibody can meet the requirements of crystallization. Based on its physical and chemical properties, the crystallization conditions were preliminarily screened, which laid a foundation for the study of its structure and function.
【作者单位】： 吉林大学公共卫生学院;上海医药集团股份有限公司中央研究院;
【分类号】：R392-33
【参考文献】
相关期刊论文 前1条
1 温宁笑;袁红梅;;非霍奇金淋巴瘤单克隆抗体治疗的研究进展[J];现代诊断与治疗;2010年04期
【共引文献】
相关期刊论文 前1条
1 王岸娜;苏子豪;吴立根;张曼;孙敬捧;;蛋白质结晶研究进展[J];河南工业大学学报(自然科学版);2014年05期
【二级参考文献】
相关期刊论文 前5条
1 范海福;对映相位双解和变型分量关系式——直接法在测定蛋白质晶体结构中的应用[J];物理学报;1984年03期
2 潘国强,范荣,徐朝银,王峰;同步辐射X射线衍射装置及其在结构生物学中的应用[J];物理;2003年02期
3 潘国强,徐朝银,赵伟昌,吴冠原;合肥同步辐射光源特性计算[J];中国科学技术大学学报;1997年01期
4 徐朝银,潘国强,吴冠原,王峰,赵飞云;X射线衍射和散射光束线设计[J];中国科学技术大学学报;1999年02期
5 赵飞云,徐朝银,吴冠原,赵伟昌,潘国强,徐军,王峰;合肥光源超导wiggler前端区[J];真空科学与技术;1999年05期
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 葛彦;人源化抗体研制策略分析及应用研究[J];国外医学(免疫学分册);2004年05期
2 初晓霞,侯明;抗血小板人源化抗体的研究进展[J];中国实验血液学杂志;2005年05期
3 孙红;岳玉环;朱平;;单克隆抗体人源化的进展及应用[J];中国生物制品学杂志;2008年01期
4 吴炜霖;仲人前;;人源化抗体的演进发展及应用现状[J];现代免疫学;2009年04期
5 邹明新;施珊珊;;人源化抗体发展概略及其在医学领域的应用[J];阴山学刊(自然科学);2010年01期
6 WinterG,李明;人源化抗体[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1994年02期
7 林芸,阎锡蕴;人源化抗体研究历程及发展趋势[J];生物工程学报;2004年01期
8 陶磊;饶春明;王兰;韩春梅;李响;高凯;王军志;;人源化抗表皮生长因子受体单克隆抗体质控方法的建立[J];中国生物制品学杂志;2013年01期
9 康向东;马艳春;张隆;吴蓉;华蕾;;抗人甲状腺球蛋白人源化单克隆抗体的制备[J];检验医学;2009年02期
10 李彦玮;常德;赵雪梅;梁平;;抗Aβ鼠源单克隆抗体的人源化改造及其表达鉴定[J];基础医学与临床;2010年08期
相关会议论文 前4条
1 吴韦霖;韩焕兴;陆惠琦;仲人前;;人源化抗体的演进发展及应用现状[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年
2 吴炜霖;;人源化抗体的演进发展及应用现状[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
3 马艳春;张隆;华蕾;魏涛;康向东;;抗hTg人源化单克隆抗体的制备[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
4 陶磊;饶春明;王兰;韩春梅;李响;高凯;王军志;;人源化抗表皮生长因子受体抗体质控方法和质量标准研究[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
相关重要报纸文章 前1条
1 记者 张亦筑;我市成功突破全人源化抗体核心技术[N];重庆日报;2013年
相关博士学位论文 前10条
1 李文平;抗人纤维蛋白单链抗体的人源化及其链亲和素融合蛋白的研究[D];中国协和医科大学;1999年
2 胡正;人源化小鼠模型在人造血和淋巴系统研究中的拓展[D];中国科学技术大学;2010年
3 叶刚;采用抗体库优化法对抗肝癌单链抗体人源化改造的研究[D];暨南大学;2007年
4 顾长国;抗巨细胞病毒人源化抗体的研究[D];第三军医大学;2005年
5 李博华;抗CD3人源化抗体的制备及生物学特性研究[D];第二军医大学;2002年
6 张海峰;新型人源化抗CD20抗体的设计及生物学功能研究[D];第二军医大学;2013年
7 张顶;DEC-205靶向抗体的制备及其人源化改造[D];北京协和医学院;2013年
8 张巍;抗人TNF-α单抗Z12识别的抗原表位研究及其人源化改造[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
9 冀学斌;人源化抗血小板膜糖蛋白GPⅡ b/Ⅲa单链噬菌体抗体的研究[D];山东大学;2005年
10 寇庚;SM5-1单克隆抗体的人源化及其体内外抗肿瘤作用研究[D];第二军医大学;2004年
相关硕士学位论文 前10条
1 李彦玮;抗Aβ鼠源单克隆抗体的人源化改造及其表达鉴定[D];中国协和医科大学;2010年
2 郑振华;基于CDR移植的高致病性禽流感病毒治疗性抗体人源化的初步研究[D];厦门大学;2009年
3 王阶平;抗人肺癌单克隆抗体3D3的人源化及分子小型化研究[D];厦门大学;2006年
4 王玲;高亲和力CD34人源化抗体的制备及鉴定[D];第二军医大学;2008年
5 郭清城;新型抗CD20人源化抗体的表征结构分析[D];第二军医大学;2012年
6 高世乾;FGF-1-mscFv的人源化改造和可溶性表达[D];东北师范大学;2013年
7 孙梦梅;抗EGFR人源化抗体的构建、表达、纯化和功能分析[D];安徽大学;2011年
8 傅晓金;人源化抗HER3单链抗体基因库的构建及筛选[D];四川抗菌素工业研究所;2015年
9 马玲;抗CD22人源化基因工程多价微型抗体的初步表达[D];广西大学;2007年
10 赵昆朋;SrTRAIL的表达与DR5单抗的人源化改造[D];河南大学;2007年
，本文编号：2237702
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/binglixuelunwen/2237702.html
