FACSAria流式细胞仪无菌操作分选高纯度细胞亚群

发布时间：2018-09-18 20:27

【摘要】：BGC823细胞瞬时转染绿色荧光蛋白(GFP)质粒2 d后,用FACSAria流式细胞仪分选GFP阳性和阴性BGC823细胞亚群,检测其分选纯度并培养分选后细胞,观察其无菌生长状态;商品化FITC直标抗体孵育SMMC7721细胞后,FACSAria流式细胞仪分选FITC阳性和阴性细胞亚群。将所有分选的细胞进行培养检测无菌状态,并观察细胞生长情况。FACSAria流式细胞仪分选得到的GFP阳性细胞群的分选纯度达99.6%,GFP阴性细胞群的分选纯度达98.8%,同时激光共聚焦荧光显微镜显示分选后的GFP阳性细胞明显富集;分选后的BGC823细胞和SMMC7721细胞常规培养,细胞均无污染且生长状态良好。
[Abstract]:After transient transfection of green fluorescent protein (GFP) plasmid into BGC823 cells for 2 days, the GFP positive and negative BGC823 cell subsets were separated by FACSAria flow cytometry. The purity of GFP positive cells and negative BGC823 cells were detected and the aseptic growth status was observed. After commercial FITC antibody was incubated with SMMC7721 cells, FACSAria flow cytometry was used to select FITC positive and negative cell subsets. All the selected cells were cultured and tested for aseptic status. The cell growth was observed. The purity of GFP positive cell group obtained by FACSAria flow cytometry was 99.60.The purity of GFP-negative cell group was 98.8.The GFP positive cells were obviously enriched by laser confocal fluorescence microscope. Both BGC823 cells and SMMC7721 cells were cultured without contamination and in good growth condition.
【作者单位】： 北京大学肿瘤医院;北京市肿瘤防治研究所中心实验室 恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金(编号:81201964)
【分类号】：R329.2

【参考文献】

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2 申泉,张丽,朱镭;流式细胞术的应用及发展[J];临床医药实践;2004年02期

【共引文献】

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2 本报记者 唐婷邋　朴淑渝;给细胞做“CT”[N];科技日报;2007年

本文编号：2249021