Smad7基因在细胞恶性转化过程中的作用研究

发布时间：2018-10-29 20:16

【摘要】：背景与目的:小分子干扰 RNA(siRNAs)可以高效、特异地阻断体内同源基因的表达,促进同源 mRNA 降解,称为 RNA 干扰(RNAi)。本研究旨在探讨 Smad7 基因的 siRNAs 是否能抑制基因的表达。 方法:我们利用 RNA 干扰技术,设计并合成了针对 Smad7 基因的siRNAs,用脂质体转染法瞬时转染 BEP2D 和 BERP35T2 细胞,用Northern blot 法检测 RNAi 效应;同时设计并合成了绿色荧光蛋白(GFP)的 siRNAs,瞬时转染稳定表达绿色荧光蛋白的 BERP35T2 细胞,检测荧光强度有无改变。 结果:RNA 干扰技术能明显抑制 Smad7 基因的表达,并能显著减弱对照组绿色荧光的表达强度。 结论:RNA 干扰技术能高效抑制 Smad7 基因的表达,为进一步研究 Smad7 基因功能及 TGF-β 信号转导通路奠定了基础。
[Abstract]:Background & objective: small molecular interference with RNA (siRNAs) can effectively block the expression of homologous genes in vivo and promote the degradation of homologous mRNA, which is called RNA interference (RNAi). The purpose of this study was to investigate whether siRNAs of Smad7 gene can inhibit gene expression. Methods: using RNA interference technique, we designed and synthesized siRNAs, for Smad7 gene transient transfection into BEP2D and BERP35T2 cells by liposome transfection. RNAi effect was detected by Northern blot method. Meanwhile, the transient transfection of green fluorescent protein (GFP) siRNAs, into BERP35T2 cells expressing green fluorescent protein (GFP) was designed and synthesized, and the fluorescence intensity was detected. Results: RNA interference could significantly inhibit the expression of Smad7 gene and decrease the intensity of green fluorescence in control group. Conclusion: RNA interference technique can effectively inhibit the expression of Smad7 gene, which lays a foundation for further study of Smad7 gene function and TGF- 尾 signal transduction pathway.
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R363

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 董柏君,黄翼然,江鱼;RNA干扰与肿瘤治疗的研究进展[J];国外医学.泌尿系统分册;2004年06期

2 黄彬,陈茶,姜傥;RNA干扰:快速关闭基因表达新技术研究进展[J];中华检验医学杂志;2004年01期

3 席晓蓉,孙强明;RNA干扰在抗HCV、HBV方面的研究进展[J];国外医学.病毒学分册;2004年06期

4 石立松;黄尚志;;RNA介导染色质水平的基因沉默[J];医学研究通讯;2005年05期

5 尹凤媛;;RNAi在基因治疗中的应用[J];临床血液学杂志(输血与检验版);2009年04期

6 杨弘;傅剑华;胡yN;黄伟钊;郑斌;王耿;;生存素表达与肺癌多药耐药株H460/cDDP化疗敏感性的关系[J];中华医学杂志;2007年27期

7 赵艳霞,顾龙君,叶启东,赵金彩;RNAi阻断NPM-ALK基因表达及对大细胞间变性淋巴瘤细胞的影响(英文)[J];中国当代儿科杂志;2005年03期

8 古聪敏;朱有凯;吴红阳;张萌;廖冰;林汉良;;短发夹RNA诱导survivin基因缄默对Jurkat细胞凋亡和增殖的影响[J];中华血液学杂志;2006年06期

9 王翠平;;RNAi在研究EGF生理效应机制中的应用[J];中国实用医药;2007年13期

10 张勇;王振宁;张学;徐惠绵;姜莉;罗阳;邢丽丽;徐米多;李娟;;小干扰RNA抑制胃癌细胞肝素酶表达及侵袭的实验研究[J];中华医学杂志;2007年24期

相关会议论文 前10条

1 ;Study of the efficacy of combination therapy of siRNAs in HepG2.2.15 cells[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年

2 胡晓慧;范磊;阮长耿;;RNA干扰法对内皮细胞基质金属蛋白酶-2功能研究[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年

3 沈鸿;肖红;陈建芳;朱东亚;;siRNA多位点逆转人神经胶质瘤细胞的多药耐药性[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年

4 岳耀敬;郭宪;焦硕;杨博辉;郭建;;分子生物学技术在动物繁殖中的应用[A];《2008中国羊业进展》论文集[C];2008年

5 李素彦;蔡燕;翁亚光;;CENP-E基因下调增强宫颈癌细胞对紫杉醇敏感性[A];中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编（2004-2008）[C];2008年

6 郭超;Alexander Endler;张敬;石红军;张军;;含红色荧光蛋白DsRed2的RNA干扰载体pDsRed2-SilencerU6构建[A];中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会论文摘要集[C];2007年

7 王玉峰;王岩峰;祝勇;邴佩旭;;SiRNA特异性抑制骨肉瘤细胞株HER-2基因的表达[A];第16届全国脊柱&四肢矫形外科（骨科）康复学术研讨会暨学习班论文汇编[C];2007年

8 胡妙凤;陶然;段群军;尚世强;杜立中;;载体法筛选人巨细胞病毒UL54基因小干扰RNA靶位筛选体系的建立[A];2007年浙江省儿科学、小儿外科学学术年会论文汇编[C];2007年

9 焦南林;王娟;郑杰;;RNA干扰导致的骨桥蛋白下调能抑制乳腺癌细胞的生长和恶性行为[A];中华医学会病理学分会2007年学术年会暨第九届全国病理大会论文汇编[C];2007年

10 肖锐;孙涛;吴同彬;魏然;卓晓宇;付向东;张翼;;大规模RNA干扰筛选具有可变剪接调控蛋白[A];湖北省暨武汉市生物化学与分子生物学学会第八届第十七次学术年会论文汇编[C];2007年

相关博士学位论文 前10条

1 夏云;靶向人端粒酶逆转录酶（hTERT）RNA干扰的建立及其生物学效应的研究[D];重庆医科大学;2005年

2 唐琳;肝再生增强因子与肝癌发生、发展关系的研究[D];重庆医科大学;2005年

3 王玉祥;RNA干扰细胞周期检测点激酶CHK1和CHK2表达对食管癌细胞照射后细胞周期阻滞的消除作用[D];河北医科大学;2005年

4 胡宗利;昆虫病原真菌金龟子绿僵菌中性海藻糖酶在孢子储藏稳定性中的作用[D];重庆大学;2005年

5 赵明敏;siRNA干扰TMV侵染及其分子机理的研究[D];西北农林科技大学;2005年

6 周晓彤;利用siRNA抑制NF-κB p65蛋白的表达对Ⅱ型血管内皮细胞激活的影响的研究[D];苏州大学;2005年

7 庄淑珍;siRNA干扰ES细胞nanog基因及nanog基因真核表达载体的构建[D];西北农林科技大学;2005年

8 胡晓慧;基质金属蛋白酶-2的基础与临床研究[D];苏州大学;2005年

9 李旭宏;IRAK-M在内毒素耐受形成机制中作用的实验研究[D];重庆医科大学;2005年

10 陶鹏;SARS冠状病毒N蛋白的细胞定位及其RNA干扰研究[D];重庆医科大学;2005年

相关硕士学位论文 前10条

1 王莹;Smad7基因在细胞恶性转化过程中的作用研究[D];重庆医科大学;2005年

2 林蔡弟;bcr/abl融合基因特异性多重siRNAs真核表达载体的构建[D];广州医学院;2010年

3 张玉诺;RNA干扰Bcl-2对人卵巢癌细胞增殖抑制作用的研究[D];重庆医科大学;2005年

4 张小飞;骨髓间充质干细胞体外心肌样细胞分化过程中结构蛋白发育的实验研究[D];重庆医科大学;2005年

5 杨慧;RNA干扰技术抗乙肝病毒的实验研究[D];山西医科大学;2005年

6 闻新棉;KLK6在乳腺癌组织与细胞中的表达与功能研究[D];山东师范大学;2005年

7 陈先锋;SOCS1负性调节Kupffer细胞内毒素信号传导的研究[D];重庆医科大学;2005年

8 王金菊;抑制结构蛋白基因对BMMSCs体外向心肌细胞分化过程中收缩蛋白基因表达的影响[D];重庆医科大学;2005年

9 邓凯贤;survivin基因为靶向的RNA干扰治疗上皮性卵巢癌的体外实验研究[D];重庆医科大学;2005年

10 刘海忠;阻断ICOS共刺激通路抗肝移植急性排斥的研究[D];重庆医科大学;2005年

，

本文编号：2298698