沙丁胺醇单克隆抗体的制备及其免疫学鉴定

发布时间：2018-11-01 18:22

【摘要】：采用混合酸酐法合成SAL-BSA和SAL-OVA,用紫外法和凝胶电泳法鉴定,使用细胞融合技术建立沙丁胺醇杂交瘤细胞株,通过体内诱生腹水法大量制备沙丁胺醇高亲和力单克隆抗体。结果显示,所免疫的小鼠抗体效价均达到10-4;融合后筛选出的3株杂交瘤细胞单抗亚型均为IgG1,细胞培养上清间接ELISA效价为1∶2.5×102~1∶1.02×103,用4D3E7细胞株制作的腹水效价为1∶5.12×105,对SAL的IC50为1.35μg/L,除与瘦肉精有10.8%交叉外,与其他β2-受体激动剂的交叉反应均小于0.2%。且具有较好的特异性。试验获得了高效价、敏感、特异的SAL mAb,为动物性食品中SAL残留的免疫学检测奠定了基础。
[Abstract]:SAL-BSA and SAL-OVA, were synthesized by mixed anhydride method and identified by UV and gel electrophoresis. Salbutamol hybridoma cell lines were established by cell fusion technique. High affinity monoclonal antibodies against salbutamol were prepared by in vivo induced ascites. The results showed that the antibody titers of the immunized mice were 10-4; The indirect ELISA titer of the supernatant of IgG1, cells was 1: 2.5 脳 10 ~ 2: 1: 1.02 脳 10 ~ 3, the ascites titer of 4D3E7 cell line was 1: 5.12 脳 10 ~ 5, and the IC50 to SAL was 1.35 渭 g / L. With the exception of 10.8% cross reaction with lean meatine, the cross reaction with other 尾 2 receptor agonists was less than 0.2%. And it has better specificity. A high titer, sensitive and specific SAL mAb, was obtained for the immunological detection of SAL residues in animal food.
【作者单位】： 河南农业科学院 河南省动物免疫学重点实验室;河南农业大学食品科学技术学院;
【基金】：农业部公益性行业(农业)科研专项(201003008-09)
【分类号】：R392

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2304724