大鼠脂肪组织来源干细胞的分离、培养、诱导分化以及与丝素材料相容性的初步研究

发布时间：2018-11-01 18:47

【摘要】：组织工程就是运用工程学和生命科学的原则和方法,研究哺乳类动物正常和病理组织的结构与功能的相互关系,并发展可恢复、保留或改善组织功能的生物替代品。组织工程的一般原则涉及活细胞与一种自然的或者人工合成的载体或支架材料的结合,构建一个三维的活性组织,使其在功能上、结构上和机制上与原组织相同。种子细胞是其中的关键环节。近来,有几项研究发现可以从人脂肪组织中分离出一种间充质干细胞,其可以向多方向分化。本课题主要探索大鼠脂肪组织中分离得到间充质干细胞的方法以及其向各方向的分化能力。主要包括六个部分: 一、大鼠脂肪组织来源的干细胞的分离、培养及鉴定 目的探索从大鼠脂肪组织中分离得到间充质干细胞的方法,以及对其干细胞表型的研究,为组织工程提供理想的种子细胞。 方法从SD大鼠的附睾处切取脂肪组织,通过消化的方法获得一群细胞,在体外完全培养基进行培养,观察其生物学特性以及细胞表面标记。 结果可以从大鼠附睾的脂肪组织中分离得到一群类成纤维细胞样细胞,可在体外稳定扩增传代。免疫荧光组织化学显示细胞表面CD44,Vimentin抗体阳性。 结论本试验方法可成功的从大鼠的脂肪组织中分离得到一群间充质干细胞,并且细胞表达CD44,Vimentin细胞表型,证明其来源于中胚层组织,在体外稳定增殖,有希望成为理想的种子细胞。 二、大鼠脂肪组织来源的干细胞向成骨方向的诱导分化 目的研究从大鼠附睾处脂肪组织中分离得到的间充质干细胞在体外诱导为
[Abstract]:Tissue engineering is to use the principles and methods of engineering and life science to study the relationship between the structure and function of normal and pathological tissues in mammals and to develop biological substitutes that can restore preserve or improve the function of tissues. The general principles of tissue engineering involve the binding of living cells to a natural or synthetic carrier or scaffold, and the construction of a three-dimensional active tissue that is functionally, structurally and mechanically the same as that of the original tissue. Seed cells are the key link. Recently, several studies have found that a mesenchymal stem cell can be isolated from human adipose tissue and can differentiate into many directions. The aim of this study was to explore the method of isolating mesenchymal stem cells (MSCs) from adipose tissue of rats and their ability to differentiate into various directions. It consists of six parts: first, the isolation of stem cells from adipose tissue in rats. Objective to explore the method of isolation and phenotype of mesenchymal stem cells from adipose tissue of rats and to provide ideal seed cells for tissue engineering. Methods Adipose tissue was removed from epididymis of SD rats. A group of cells were obtained by digestion and cultured in vitro. The biological characteristics and cell surface markers were observed. Results A group of fibroblast-like cells could be isolated from adipose tissue of rat epididymis and cultured stably in vitro. Immunofluorescence histochemistry showed that CD44,Vimentin antibody was positive on cell surface. Conclusion in this study, a group of mesenchymal stem cells were isolated from adipose tissue of rats, and the cells expressed phenotype of CD44,Vimentin cells, which proved that the cells derived from mesoderm tissue and proliferated stably in vitro. There is hope of becoming the ideal seed cell. Second, the induction and differentiation of adipose stem cells from rat adipose tissue to osteogenesis objective to study the differentiation of mesenchymal stem cells isolated from adipose tissue of rat epididymis in vitro
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R329.2

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