基于压电免疫生物传感器的大肠杆菌O157：H7检测方法研究

发布时间：2019-07-02 14:05

【摘要】：大肠杆菌O157:H7作为食源性致病菌存在流行暴发的可能性和感染的严重性,急需研制一种快速准确的检测方法。本课题根据石英晶体微天平良好的质量响应特性,在QCM石英金电极表面采用四种不同的抗体固定方法,将抗体固定在电极表面,并通过两种分析方法来检测大肠杆菌O157:H7。根据不同浓度的菌体溶液响应值存在规律性来测定菌体浓度。建立了基于QCM的压电免疫生物传感器的微生物检测系统,能够快速准确的检测大肠杆菌O157:H7。 本课题的主要研究内容和研究结果如下: 1.采用四种抗体固定方法:硅烷固定法,聚乙烯亚胺固定法,3-巯基丙酸固定法和蛋白A固定法等将抗体固定于金电极表面,并通过两种分析方法:气相分析法和流动注射法来跟踪了解石英金电极表面每一步反应的频率变化。结果表明,蛋白A固定法与流动注射法联合使用是最佳的QCM检测大肠杆菌O157:H7方法。 2.利用蛋白A固定法和流动注射法联合使用时,蛋白A浓度和抗体的浓度对结果有影响,实验证明蛋白A最佳浓度为0.5mg/mL,抗体最佳浓度为1.0mg/mL。 3.选择最佳的抗体固定方法和分析方法,通过频率变化量的差异对不同浓度的大肠杆菌O157:H7溶液进行定量检测,检测限为7.33×10~3CFU/mL,检测范围为7.33×10~3CFU/mL～7.33×10~8CFU/mL,在此范围内,其频率变化值和浓度的响应方程式为:△f=6.9LogC-10.5。 以上实验研究,为今后压电免疫生物传感器在食品致病菌的检测研究应用打下基础,为从事食品安全研究与检测提供相应的技术支撑。
[Abstract]:As the possibility of epidemic outbreak of food-borne pathogenic bacteria and the severity of infection, it is urgent to develop a rapid and accurate detection method of Escherichia coli O157:H7. According to the good quality response characteristics of quartz crystal microbalance, four different antibody fixation methods were used on the surface of QCM quartz gold electrode to fix the antibody on the electrode surface, and the E. coli O157 鈮，

本文编号：2508992