BAM22在正常和CFA炎症大鼠脊髓和背根神经节中的表达

发布时间：2019-08-09 06:58

【摘要】： 近来发现，内源性阿片肽牛肾上腺髓质22肽(Bovine adrenal medulla 22，BAM22)除了与μ-、δ-和κ-阿片受体结合之外，还能与感觉神经元特异性受体(sensoryneuron-specific receptor，SNSR)结合。这些研究表明BAM22可能是一个重要的内源性阿片肽。然而，BAM22在啮齿类动物脊髓水平的分布至今仍不清楚。本实验探讨BAM22在大鼠脊髓背角和背根神经节(dorsal root ganglion，DRG)中的分布和细胞学定位。方法：(1)采用大鼠一侧后足掌皮下注射完全弗氏佐剂(Complete Freund's adjuvant，CFA)建立炎性痛模型。将SD雄性大鼠(250-270 g)随机分为对照组(saline组，n=6)和实验组(CFA组，n=6)。运用免疫组化技术检测了正常和CFA炎症大鼠脊髓背角及DRG中BAM22的表达。同时用双标免疫组化方法对炎症鼠的脊髓背角Fos和BAM22的共存关系进行研究。(2)对CFA炎症大鼠鞘内注射BAM22特异性抗体，分为对照组(saline组，n=7)和实验组(BAM22抗体组，n=7)。观察BAM22特异性抗体对CFA炎症模型大鼠机械性刺激阈值的影响，探讨内源性BAM22在炎症过程中的生理作用。(3)对大鼠实施机械性背根切断手术，分为假手术组(n=5)和手术组(n=5)。运用免疫组化技术检测了大鼠脊髓背角中BAM22的表达。结果发现：(1)BAM22主要表达于大鼠脊髓背角浅层和DRG中；(2)BAM22主要存在于中、小型DRG神经元中。19％DRG神经元表达BAM22。(3)切断背根后，脊髓背角浅层BAM22的表达下降了85％。提示BAM22主要存在于初级传入的中枢突，，是由DRG神经元合成而来。(4)足底注射CFA产生外周炎症后，BAM22在脊髓背角浅层和DRG神经元中的表达均显著性上调，大约增加了2倍。(5)双标结果表明：在脊髓背角的Fos阳性细胞核周围有BAM22包绕，且与浅层BAM22纤维紧密联结。(6)鞘内注射BAM22抗体后，CFA诱导的大鼠机械痛觉过敏症状增强了。结果表明：脊髓背角和DRG中的BAM22参与了伤害性信息的传递。也提示：BAM22可能是DRG传入纤维中枢端阿片受体和SNSR的内源性配体。
【图文】：

示意图,初级感觉神经元,脊髓背角神经元,阿片

接降低Ca2+电导，关闭C末梢上的ca2+通道，或间接地由于K+电导的增加，减少ca2+进入c传入末梢，阻止兴奋性递质如P物质和谷氨酸的释放，从而通过突触前抑制抑制了背角痛敏神经元的活动(见图1一l)。在大鼠脊髓背角，许多研究1108一“2】利用电生理技术观察到内源性阿片肤(OFQ、ENK、EM和Dyn一A)及阿片受体激动剂可分别通过作用于初级传入终末上的孤啡肤受体以及户一、6一、K一受体，使兴奋性神经递质Glu的释放量减少，从而抑制兴奋性突触传递。另有研究l科，45]证明，阿片肤能增加背角伤害性神经元的K+电导，使膜超极化，抑制神经元的活动，产生突触后抑制(见图1一1)。有人(Luo等2001;Jeftinija

示意图,外周,示意图,基序

pAGRVM图1一 2pAG(中脑导水管周围灰质)和RvM(延髓吻端腹内侧区)内局部神经元回路示意图[l2z]Figl一 2SchematierePresentationofsignalingPathwaysof10calPAG(Periaqueduetalgray)andRVM(rostral ventromedialmedullar)neurons L6SNSR的结构与分布原位杂交(ISH)分析表明人和大鼠的 sNSRmRNA仅在背根神经节(DRG)和三叉神经节表达ls9】。人和大鼠的SNSR组成一族预计有7个a-螺旋跨膜域，带高度保守基序的新的G蛋白偶联受体。用BAM22片段和其他proenkephalinA来源的肤如E肤(BAM3200或BAM(1一25))进行的结构一功能研究表明:激活SNSR所需的结构与激活阿片受体所需的是不同的。经典的阿片Met一enkephalin基序YGGFM在激活SNSR的作用中是不需要的(Met一enkePhalin基序是激活阿片受体所需的结构)。免疫组织化学双标实验进一步明确了SNSR的分布范围。发现其主要是分布在IB4+的小型伤害性感受器。这类感受器是传递伤害性刺激的无髓纤维(C纤维)的两大类之一(见图1一3)。大部分小型伤害性感受器能感受伤害性机械、热和化学刺激，主要被分为两大类:sP/eoRp门rrkA类型和IB4+类型[40]。sNsR主要分布于IB4+型DRo细胞。SNsR能被BAMS一22和BAM22有效的激活。BAM22，前脑啡肤原经蛋白水解酶裂解产
【学位授予单位】：福建师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R363

【参考文献】