Endomorphin-1降低大鼠动脉血压作用机制的实验研究

发布时间：2019-08-24 08:35

【摘要】： 目的：观察内吗啡肽-1(endomorphin-1，EM-1)对去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，ANGⅡ)诱导的大鼠离体胸主动脉条张力的影响以及外周静脉(intravenous inject，iv)和侧脑室(intracerebroventricular，icv)分别注射EM-1及其阻断剂对大鼠动脉血压，心功能和血清NO含量以及NOS活性的影响，探讨EM-1降低大鼠动脉血压的机制。 方法：(1)Wistar大鼠用20％氨基甲酸乙酯(5ml／kg)腹腔注射麻醉，颈椎脱位处死，迅速取出胸主动脉，浸入Krebs Henseleit液中，去除血管周围的结缔组织，剪成2.5-3.0mm宽、10mm长的螺旋条，置于持续通入95％O_2和5％CO_2混合气的KrebsHenseleit液的玻璃浴槽中，温度37.0±0.5℃，预负荷1g。平衡1h后，用ACh(10~(-6)mol／L)检测内皮细胞活性，然后加入NE(10~(-6)mol／L)和ANGⅡ(10~(-7)mol／L)收缩血管作为预处理，5分钟后给予EM-1(10~(-8)-10~(-6)mol几)记录收缩强度。拮抗组提前5分钟分别给予μ受体阻断剂cyprodime(10~(-6)mol／L)和NO合成酶抑制剂Nω硝基-L精氨酸(Nω-nitrolarginine，L-NNA)(10~(-5)mol／L)，然后记录给予EM-1(10~(-6)mol／L)后的动脉条收缩强度。其中一组用棉签去除内皮，以观察内皮对EM-1作用的影响。Wistar大鼠随机分为对照组(生理盐水)，EM-1组，EM-1+拮抗剂组，每组6只，每组只给予一种处理。 (2)Wistar大鼠28只，随机分为动脉血压测定组(n=13)和心功能测定组(n=15)，20％氨基甲酸乙酯(5ml／kg)腹腔注射麻醉。动脉血压测定组行右颈总动脉插管，记录动脉血压曲线，分析测量收缩压(systolic blood pressure，SBP)，舒张压(diastolic blood pressure，DBP)，平均动脉压(mean arterial pressure，MAP)以及心率(heart rate，HR)等指标。心功能测定组行左心室插管，记录室内压曲线，分析测量左心室收缩压(leftventeicular systolic pressuer，LVSP)，室内压峰值(Peak)，室内压最大上升速率(+dP／dt_(max))，室内压最大下降速率(-dP／dt_(max))和心率(HR)等心功能指标。同时测定血清NO含量和NOS活性的变化。左颈外静脉插管作静脉注射给药。观察不同剂量EM-1(10，20，50μg／kg)对大鼠动脉血压，心功能以及血清NO含量和NOS活性的影响。以及观察μ受体阻断剂cyprodime(1mg／kg)，NO合成酶抑制剂L-NNA(25mg／kg)等药物对EM-1作用的影响。部分大鼠作双侧迷走神经切断术以观察迷走神经对EM-1作用的影响。 (3)Wistar大鼠32只，预先左侧脑室埋植套管，术后3天进行实验。大鼠随机分为动脉血压测定组(n=14)和心功能测定组(n=18)，20％氨基甲酸乙酯(5ml／kg)腹腔注射麻醉。动脉血压测定组行右颈总动脉插管，记录动脉血压曲线，，分析记录以及SBP，DBP，MAP和HR等指标。心功能测定组行左心室插管，记录室内压曲线，分析记录LVSP，Peak，±dP／dt_(max)和HR等心功能指标。同时测定血清NO含量和NOS活性的变化。侧脑室注射给药，观察不同剂量EM-1(10，20，50μg／kg)对麻醉大鼠动脉血压，心功能以及血清NO含量和NOS活性的影响。以及观察侧脑室注射μ受体阻断剂cyprodime(125μg／kg)，M受体阻断剂阿托品(atropine，Atr)(25μg／kg)，静脉注射NO合成酶抑制剂L-NNA(25mg／kg)等药物对EM-1作用的影响。部分大鼠作双侧迷走神经切断术以观察迷走神经对EM-1作用的影响。 结果：(1)在无内皮细胞活性的Wistar大鼠离体胸主动脉条中，EM-1不改变NE和ANGⅡ预收缩的血管张力(P＞0.05)；在完整内皮细胞活性的大鼠离体胸主动脉条中EM-1剂量依赖性减弱NE和ANGⅡ预收缩的血管张力(P＜0.01)，cyprodime和L-NNA可阻断其效应(P＜0.01)。 (2)在动脉血压测定组iv EM-1剂量依赖性减弱麻醉大鼠SBP、DBP、MAP和HR(P＜0.05，P＜0.01)，血清NO含量和NOS活性升高(P＜0.01和P＜0.01)；在心功能测定组iv EM-1剂量依赖性减弱麻醉大鼠LVSP，Peak，±dP／dt_(max)和HR等心功能指标(P＜0.05，P＜0.01)；iv cyprodime和iv L-NNA可以阻断iv EM-1对动脉血压，血清NO含量和NOS活性的影响。切断双侧迷走神经可减弱iv EM-1引起的动脉血压降低和心功能减弱效应(P＜0.01)，但iv L-NNA不能消除EM-1对心功能减弱的影响(P＞0.05)。 (3)在动脉血压测定组icv EM-1剂量依赖性减弱麻醉大鼠SBP、DBP、MAP和HR(P＜0.05，P＜0.01)，血清NO含量和NOS活性均无明显变化(P＞0.05)；在心功能测定组icv EM-1剂量依赖性减弱麻醉大鼠LVSP，Peak，±dP／dt_(max)和HR等心功能指标(P＜0.05，P＜0.01)。icv cyprodime可阻断，icy M受体阻断剂阿托品以及切断双侧迷走神经可大部分消除icv EM-1引起的动脉血压减弱和心功能减弱效应(P＜0.01)，但iv L-NNA对icv EM-1引起的动脉血压减弱和心功能减弱效应均无影响(P＞0.05)。 结论：EM-1能够降低麻醉大鼠动脉血压，其作用机理既有外周机制，亦有中枢机制。在外周可能主要通过作用血管内皮μ阿片受体，激活NOS的活性，引起血管内皮NO的释放导致血管平滑肌舒张，外周阻力降低而降低动脉血压。在中枢，EM-1可能通过中枢μ阿片受体引起迷走神经兴奋，减弱心室收缩功能而降低动脉血压。此外，尚有中枢M受体的参与。
【图文】：

此效应分别被e即rodime(10一6mol几)和L一洲A(10一smol/L)阻断(P<0.0一)(表1)。且EM一(10‘8一10一6mol·L一，)可以剂量依赖地降低NE(20‘7moz/L)和胡011(10一6mol/L)预收缩的血管张力(图1)。表 1cyProdime和L~NNA对EM一l降低有内皮大鼠离体血管平滑肌张力的影响(n!二6，x姚，)处理张力/gNE组 ANG11组对照组 1.14士0.07 1.63士0.12EM一l+NS 0.36士0.04 0.51士0.04EM一l+eyProdimeEM一1+L一NNA 1.13士 0.081.62士0.12 1.14士 0.071.64士0.10与对照组比较’P<0.0一，与EM一l+Ns组比较 #P<0.02NE。o”mol几)， ANo11(lo.6mol几)，EM·l(10一mo况)，eyprodime(10’6mo一几)，L一溯^(一0.

图2ivEM一1对大鼠平均动脉血压(MAP)的影响n=7，x士s，与Ns组比较‘P<0.0-1.EM一110林g/k92.EM一120林g/kg3.EM·150林g/k一NNA，Cyprodime及剪断双侧迷走神经对动脉血压，响.NNA(25m眺g)，C甲odime(lm眺g)以及剪断双侧迷n后平均动脉压恢复至基础值(P>0.05，与预处理前比较平均动脉压恢复至基础值(P>0.05，与预处理前比较)。均动脉压变化值分别为。4.62士1.04mlnHgl，(一31.51nunHg)。实验结果表明ivEM一l引起的血压下降效
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R363

【参考文献】

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本文编号：2528845