同种异体大鼠骨髓及肝联合移植动物模型的建立及意义

发布时间：2019-08-27 10:27

【摘要】： 目的 探讨建立同种异体大鼠骨髓及肝联合移植动物模型的方法，初步研究提高大鼠肝移植模型的稳定性和动物存活率的方法及可行性。 方法 将SD大鼠(♂)、Wistar大鼠(♀)分成三组：Ⅰ组大鼠Kamada“二袖套法”行SD→Wistar大鼠肝移植；Ⅱ组Wistar大鼠(♀)TBI(11Gy)，4小时后输入SD大鼠(♂)BMC(8×10~7)，28天后Kamada“二袖套法”行SD→Wistar大鼠肝移植；Ⅲ组Wistar大鼠(♀)TBI(7Gy)，4小时后输入SD大鼠(♂)BMC(8×10~7)，2天后CTX(50 mg／kg)腹腔注射，28天后Kamada“二袖套法”行SD→Wistar大鼠肝移植。分别于BMT后10，20天通过PCR方法检测Ⅱ组和Ⅲ组Wistar大鼠体内的SD大鼠源性Y染色体特异性片段，并比较三组大鼠肝移植术后1周生存率、生存状况及生存时间。 结果 Ⅱ组和Ⅲ组大鼠外周血均检测出SD大鼠源性嵌合体。DTH检查显示对SD大鼠产生免疫耐受。肝移植结果显示：Ⅰ组大鼠均在4～5d死亡，而Ⅱ组和Ⅲ组大鼠1周存活率为80％和84.2％，但Ⅱ组的生存状况不如Ⅲ组。 结论 应用7GyTBI＋CTX＋供体BMT可成功建立同种异体大鼠嵌合体模型，诱导特异性免疫耐受，大大提高肝移植术后大鼠的生存状况及生存时间。
【图文】：

IVC)套管，分别采用血管穿刺管外鞘管制成，长约4Inln，外径分别为2.1二和2.7Inln，管体与管柄各半，管体中段环形刻下浅槽，以防血管套上后滑脱并有利于固定结扎线。胆总管插管采用硬膜外麻醉导管，长约3Inln(见图1)。采用上海手术器械厂的显微外科手术器械包， Satinsky钳，5一0、7一0医用无损伤缝合针线，，在手术显微镜下双人操作完成。肝下下腔静脉套管价睁脉龚管胆总管捅管图1各种套管示意图(二)供肝的获取:供体采用10%水合氯醛0.2一0.39/kg作腹腔注射麻醉。仰卧位，固定四肢。腹部去毛，3%碘伏消毒。十字切口入腹。分别以湿润的棉签和盐水小纱布作钝性分离和辅助暴露，避免用手或手指在腹腔内粗暴操作。游离肝下下腔静脉，结扎右肾上腺静脉，并切断右肾动静脉。顺时针方向游离肝周韧带，近肝侧结扎并离断左隔下静脉，结扎并切断左肝至食管高位血管支

紧贴隔肌环剪去隔肌水平以上SVC及隔肌组织，仅保留隔肌环。SVC左右两侧7一0无损伤缝线各缝1针。修整IVC及PV，在4℃乳酸林格液中将门静脉与肝下下腔静脉壁外翻，分别套在自制的聚乙烯管上，用5一0丝线环扎固定，完成袖套制备(见图2)。冶图2袖套制备示意图(四)受体原位肝移植:大鼠麻醉后，上腹部直切口入腹，采用自制拉钩，腰桥充分暴露手术野。分步游离受体肝脏，游离完毕后将受体肝脏取出。将供肝自4℃乳酸林格液保存液中取出置于受体原位，冰生理盐水纱布覆盖肝脏，并间断用冰生理盐水冲洗肝脏表面，7一0无损伤线吻合肝上下腔静脉，一般先缝合后壁，再缝合前壁，吻合时，向肝上下腔静脉内注入4℃生理盐水，驱出血管腔内的空气(见图3)。吻合成功后，经门静脉向供肝内灌注4℃生理盐水10ml，排除肝内的肝素乳酸林格液，夹闭肝下下腔静脉，将供肝门静脉套管插入受体门静脉内
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R-332;R617

【参考文献】

相关期刊论文 前4条

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本文编号：2529711