玄丹散结汤对子宫腺肌病模型小鼠痛觉过敏的疗效评价及作用机理初探

发布时间：2019-09-12 02:43

【摘要】：目的：在成功建立子宫腺肌病小鼠模型的基础上,通过一系列实验方法和疗效指标,评价玄丹散结汤对腺肌病模型小鼠痛觉过敏的疗效,并探讨其作用机理。方法：将新生ICR小鼠随机分为5组,设为空白组、模型组、西药组、低剂量中药组和高剂量中药组,空白组为对照组,模型组、西药组、低剂量中药组和高剂量中药组为实验组。实验组小鼠运用口服他莫昔芬法建立子宫腺肌病小鼠模型,3月后从模型组、西药组、低剂量中药组、高剂量中药组中随机选取6只,分别给予一定浓度的蒸馏水、达那唑、低剂量的玄丹散结汤和高剂量的玄丹散结汤灌胃。从对照组中随机选取6只,予蒸馏水灌胃。每组小鼠每天灌胃1次,灌5天停2天,连续2月。期间通过疼痛行为学实验(甩尾实验、热板实验、机刺实验、丙酮实验及扭体实验)观察各组小鼠疼痛敏感度变化并评价玄丹散结汤的镇痛效果。2月后处死小鼠,肉眼观察子宫充血情况及体积大小,电子秤称量子宫、卵巢重量,游标卡尺测量子宫直径。显微镜下观察小鼠子宫病灶结节数。收集小鼠子宫组织和背根神经节,将子宫组织制成石蜡切片,行HE染色观察子宫组织形态学变化,记录病理评分,免疫组化、RT-PCR检测子宫组织、背根神经节中神经生长因子β(NGF-β)、p75神经营养因子受体(p75NTR)、酪氨酸激酶受体A(TrkA)蛋白及mRNA表达的情况,行统计学分析。结果：1.疼痛行为学实验结果：实验组小鼠比对照组小鼠疼痛阈值更低,对疼痛更敏感。实验组之间对比,高、低剂量中药组和西药组小鼠的疼痛阈值比模型组高,表明玄丹散结汤和达那唑能够缓解腺肌病模型小鼠的疼痛症状,降低小鼠对疼痛的敏感度。其中高剂量中药组对小鼠疼痛阈值的提升最明显,表明高剂量的玄丹散结汤治疗效果最好。2.药物疗效结果：中药组和西药组均能缩小子宫体积,减轻子宫重量,改善表面充血现象,减少病灶节结数和降低病理评分,表明玄丹散结汤和达那唑对腺肌病模型小鼠均有效,并且高剂量的玄丹散结汤疗效最佳。3.免疫组化及RT-PCR结果：子宫组织中,实验组与对照组比较,NGF-β、p75NTR、 TrkA蛋白及mRNA的表达水平均有显著上调。实验组间比较,模型组表达水平最高,高剂量中药组表达水平最低。背根神经节中,实验组与对照组比较,p75NTR mRNA表达水平无显著差异,TrkA mRNA表达水平显著上调。实验组间比较,p75NTR mRNA表达水平在各组间无明显差异,TrkA mRNA在模型组中表达最高,在高剂量中药组中表达最低。结论：1 口服他莫昔芬法能够成功建立子宫腺肌病动物模型,可用于临床疾病研究2 玄丹散结汤能够缓解腺肌病模型小鼠痛觉过敏。3 NGF及其受体可能参与了子宫腺肌病痛疼机制,玄丹散结汤缓解腺肌病疼痛可能是通过抑制腺肌病病灶中NGF及其受体的表达实现的。
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332

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本文编号：2534846