体外三维培养条件下转化生长因子β1基因转染的兔骨髓间充质干细胞促成软骨细胞分化的实验研究

发布时间：2019-09-29 02:40

【摘要】：目的:探讨体外基因转染及三维培养体系对诱导BMSCs向软骨细胞定向分化的影响。方法:研究体外单层培养及三维培养条件下BMSCs传代、增殖的生物学特性;构建TGF-β1基因重组腺病毒粘粒载体和重组腺病毒载体Ad.TGF-β1;研究Ad.TGF-β1基因转染的兔骨髓间充质干细胞促成软骨细胞分化的影响。结果:我们采用全骨髓漂洗法获取兔长骨腔骨髓血并结合密度梯度离心法从骨髓血中分离出BMSCs加以纯化,并成功进行体外单层培养及三维培养,构建了较为稳定的BMSCs体外三维培养体系;建立了安全、稳定、有效的TGF-β1基因重组腺病毒载体Ad.TGF-β1构建方法;转染TGF-β1后BMSCs能持久地分泌显著增加的特异性软骨细胞外基质成分Collagen Ⅱ、蛋白多糖等,且转染后三维培养组优于单层培养组。结论:体外基因转染及三维培养体系具有明显的促进诱导BMSCs更好向软骨细胞分化的作用。
【图文】：

阵医大学俘士学位论文第一部分骨外科专业胞逐渐坏死并随换液次数的增多而被清除。原代培养4一5天贴壁细胞开始增殖并转化为三角形、多角形和梭形(图1一B1)。8一9天后，部分区域形成细胞集落，集落大小不均，集落中心细胞生长状态良好，细胞呈现成纤维细胞梭形外观(图1一IC)，有较多突起，胞核明显，呈卵圆形，可见1一3个核仁，胞质丰富、清晰。外围细胞呈放射状向外分布。生长期细胞分裂相多见，细胞突起互相联接。10一15天细胞已达90%融合，细胞集落之间互相重叠

阵医大学俘士学位论文第一部分骨外科专业胞逐渐坏死并随换液次数的增多而被清除。原代培养4一5天贴壁细胞开始增殖并转化为三角形、多角形和梭形(图1一B1)。8一9天后，部分区域形成细胞集落，集落大小不均，集落中心细胞生长状态良好，细胞呈现成纤维细胞梭形外观(图1一IC)，有较多突起，胞核明显，，呈卵圆形，可见1一3个核仁，胞质丰富、清晰。外围细胞呈放射状向外分布。生长期细胞分裂相多见，细胞突起互相联接。10一15天细胞已达90%融合，细胞集落之间互相重叠
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R329.2

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本文编号：2543627