超滤截留狂犬疫苗残留DNA的工艺优化和机制探讨

发布时间：2019-11-06 23:59

【摘要】：目的通过优化生产工艺来控制以VERO细胞为载体的狂犬疫苗生产中的残留DNA。方法采用双抗体夹心ELISA法检测评估抗原回收率,通过DNA探针杂交法检测残留DNA。采用检测抗原回收率和DNA残留率对狂犬疫苗生产中的核心环节-超滤的3个关键因素:超滤膜包的选择、超滤压力以及浓缩倍数进行评估,并评价鱼精蛋白预处理超滤液对于上述两指标的影响。结果与结论综合抗原回收率、DNA去除率以及生产层面的因素,获得了超滤工艺的最优条件,即以截留相对分子质量为7.5×105的超滤膜包、20倍浓缩和15 psi的超滤压力作为超滤工艺的核心参数。通过鱼精蛋白的预处理,初步探明超滤截留是通过分子筛的模式截留DNA,而鱼精蛋白的加入可以结合碎片化的DNA,形成较大的分子片段,从而更利于超滤截留。

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