LTB-hpaA融合基因原核表达产物的鉴定及其免疫保护作用

发布时间：2019-11-09 16:43

【摘要】：分别从幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株Y06和大肠杆菌44851株DNA中扩增ltB和hpaA基因,构建ltB-hpaA融合基因及其原核表达系统,鉴定其表达产物的免疫原性、佐剂活性及其对Hp SS1株感染小鼠的保护作用.采用PCR分别从上述菌株DNA中扩增hpaA基因和ltB基因片段,构建ltB-hpaA融合基因,T-A克隆后测定核苷酸序列.采用质粒pQE32和宿主菌E.coliM15构建ltB-hpaA融合基因表达系统,并用不同浓度的IPTG诱导表达.采用western blot和GM1-ELISA鉴定表达产物的抗原性、免疫反应性和佐剂活性.建立HpSS1株
【图文】：

ltB-hpaA基因和ltB-hpaA融合基因目的扩增条带

与上述GenBank登录的4个ltB和6个hpaA基因序列比较,所克隆的hpaA和ltB核苷酸序列相似性分别为94.25%~97.32%和99.12%~99.71%,氨基酸序列相似性为95.38%~98.46%和97.58%~99.19%.ltB、hpaA基因和ltB-hpaA融合基因序列完全相同(见图2).

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