Smad蛋白在ERK信号转导通路中的作用及对血管平滑肌增殖的影响

发布时间：2020-02-05 10:55

【摘要】： 血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的增殖肥大是高血压、动脉粥样硬化等多种血管增殖性疾病共同的细胞病理基础之一,研究表明在介导VSMC增殖肥大中起主要作用的是G蛋白偶联受体通路、酪氨酸蛋白激酶(tyrosine protein kinase,TPK)通路、整合素介导的信号转导通路和转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad通路。此外,还存在着许多已知和未知的信号通路,它们在多个层次上发生交互调节,构成复杂的细胞信号转导网络,共同决定细胞的生物学行为。 已知ERK通路和TGF-? /Smad通路在许多细胞中可发生对话,共同协调细胞的一些生物学行为,并且这两条通路都可促进VSMC的增殖。但在VSMC内,这两条通路是否存在交互调节及其它们之间发生交互调节的具体环节及分子机制目前还不清楚。 本实验在原代培养人脐动脉平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cells,hUASMC)的基础上,取3-15代hUASMC用于实验,实验分四组:对照组,血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)组,ERK阻断剂(PD98059)组和PDGF+ERK阻断剂组。继续培养24h后,用MTT法测细胞的增殖活性,用免疫细胞化学技术测细胞内核增殖抗原(proliferation of cell nucleus antigen,PCNA)、磷酸化ERK、磷酸化Smad2/3蛋白的表达;用RT-PCR法测细胞内Smad2/3 mRNA的表达。 结果:(1)与对照组相比,PDGF组hUASMC内PCNA的表达明显增强,MTT法测得A值也升高(P0.01),ERK阻断剂组和PDGF+ERK阻断剂组hUASMC内PCNA的表达和MTT法测得的A值比PDGF组明显减少,与对照组无差异;(2)与对照组相比,PDGF组hUASMC内磷酸化ERK的表达明显增强(P0.01),ERK阻断剂组和PDGF+ERK阻断剂组hUASMC内磷酸化ERK的表达比PDGF组明显减少,与对照组无差异;(3)与对照组相比,PDGF组hUASMC内磷酸化Smad2/3的表达明显增强(P0.01),ERK阻断剂组和PDGF+ERK阻断剂组hUASMC内磷酸化Smad2/3的表达比PDGF组明显减少,与对照组无差异;(4)各组间hUASMC内Smad2/3 mRNA的表达无差异。 结论:(1)PDGF可诱导hUASMC增殖,在此过程中ERK通路发挥重要的调节作用;(2)在hUASMC内,Smad蛋白是ERK的下游信号分子之一,ERK通路激活后可引起Smad蛋白磷酸化,并介导了hUASMC的增殖;(3)在hUASMC内,ERK通路对
【图文】：

16Fig 5 Expression of phosphorylated ERK protein in hUSMC from different groups (SP method,×200,except F)A.Control group;B:PDGF group;C.ERK blocking agent group;D.PDGF+ERK blocking agent group;E.Negative control(The primary antibody was substitued with goat serum);F.Positive expression ofphosphorylated ERK protein in hUSMC(SP method,×400)图 5 各组 hUSMC 内磷酸化 ERK 蛋白的表达

各组hUSMC内PCNA的表达EF
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R363

【参考文献】

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本文编号：2576629