中国人群CYP2D6基因多态性的基因芯片测定及其对曲马多与美托洛尔代谢性相互作用的影响

发布时间：2020-02-28 14:51

【摘要】： 细胞色素P4502D6(CYP2D6)是一种重要的药物代谢酶,参与临床近百种重要药物的代谢,而且对药物的代谢呈现出明显的个体差异和种族差异,这是造成临床用药个体差异的重要原因。CYP2D6是最具有基因多态性的药物代谢酶,目前已发现有七十多个变异位点。本研究拟制备基因芯片,测定中国人群CYP2D6基因多态性的分布频率,并研究不同基因型的中国健康志愿者体内曲马多和美托洛尔的代谢特点及其对两药相互作用的影响。 1.基因芯片法测定中国人群CYP2D6基因多态性根据CYP2D6基因序列的多态性分布特点,针对在中国人群药物代谢中具有潜在作用的突变位点C188T和G4268C(CYP2D6*2和CYP2D6*10),设计寡核苷酸探针,制备寡核苷酸芯片,测定312例中国健康志愿者CYP2D6的基因型,并使用直接测序法对分型结果进行验证,探讨基因芯片技术应用于CYP2D6基因分型的可行性。结果312例中国健康志愿者中CYP2D6*2和CYP2D6*10的变异频率分别为CYP2D6*2W*10W 8.3%, *2H*10W 13.5%, *2M*10W 10.6%, *2M*10H 17.0%, *2M*10M 34.6%, *2H*10H 9.6%, *2H*10M 6.4%。对部分样本采用直接测序的方法进行进一步确证,结果完全吻合。说明本研究建立的基因芯片适用于中国人群CYP2D6基因分型研究。 2.中国人群CYP2D6基因多态性对曲马多药代动力学的影响按照变异位点,筛选40例健康志愿者,分为四组进行试验,每组10人。第一组:CYP2D6*2W*10W,第二组:CYP2D6*2H*10W和CYP2D6*2M*10W,
【图文】：

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4. 实验结果4.1 匹配与错配探针信号强度比值的确定按照标准野生型与突变型质粒模板的杂交结果，在优化的杂交条件与严洗脱条件下，完全匹配的探针与单碱基错配的探针间，信号强度存在明显的匹配与错配探针信号强度比值至少相差 4 倍。对基因芯片技术来说，杂合型基因的检测是一个难点。在本研究中，人工构建杂合型模板的杂交结果显示于杂合型等位基因的探针对，其信号强度比值小于 2.5（信号比值为强信号号）。用基因组 DNA 所做的重复实验得到近似结果。因而认为信号比值大或小于 2.5 对分型结果的判断有意义而当信号值在 2.5-4 范围内应重测。CY基因分型检测信号如图 1-1 所示。CYP2D6 基因分型芯片微阵列示意图见图

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P2D6基因分型芯片微阵列示意图NA 样本的基因分型结果为中国汉族人，将检测的两个 SNP 位点(C186*10 和 CYP2D6*2，每种结果均可分为三种基变型（mutant type, M）、杂合型（heterozygote, H有 7 种基因类型出现，，未发现 CYP2D6*2W*1复实验得到相同的结果。312 例 DNA 样本的基果
【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R394;R96

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