bFGF影响体外培养的不同分化阶段成骨细胞活性及凋亡的实验研究

发布时间：2020-03-21 06:49

【摘要】： 目的：探讨bFGF(basic fibroblast growth factor，bFGF)调节成骨细胞活性和凋亡与细胞分化的关系。材料与方法：用组织块培养方法作SD大鼠胎鼠骨源性成骨细胞的体外培养，获取实验细胞模型并划分其分化阶段。在成骨细胞不同分化阶段加入10μg／L的bFGF培养3天后，利用生物化学技术、放射免疫技术检测不同分化阶段成骨细胞活性及bFGF对成骨细胞活性的影响；并用流式细胞仪检测法(flow cytometer，FCM)检测DNA含量及Bcl-2、Fas的表达，分析bFGF对不同分化阶段成骨细胞凋亡及其相关基因Bcl-2、Fas的影响。未加bFGF者为对照组。结果：取SD大鼠胎鼠颅骨利用组织培养方法分离培养出的细胞，经形态学和ALP(alkaline phosphatas，ALP)、OC(osteocalcin，OC)测定，鉴定为高纯度成骨细胞，且具有分化的阶段性。bFGF组中ALP含量较对照组低，OC含量与对照组相比有增加趋势。流式细胞仪检测到bFGF组中各分化时期组成骨细胞凋亡率均较相对应的对照组低，Bcl-2的表达均较对照组高，Fas抗原的表达显著低于对照组。结论：bFGF(10μg／L)抑制分化中成骨细胞ALP活性，对OC增加影响不明显；bFGF对分化中成骨细胞凋亡有抑制作用，其机理与调节Bcl-2和Fas的表达有关。
【图文】：

原代培养的前三天见培养瓶中有较多的组织碎屑，培养的第三天起己可看到个别碎骨块周围有细胞出现，未完全贴壁的细胞大成圆形或类圆形，，有的细胞刚从骨块游出，尚未完全脱离骨块周缘(见图1)。随着游出，细胞体积增大，细胞有的单个存在，有的集成团，同时己可看到贴壁的细胞，

培养至第6天，局部细胞呈集落样生长100X
【学位授予单位】：昆明医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R329

【引证文献】

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1 张娜;脉冲电磁场对成骨细胞增殖、分化功能和Osterix基因表达的影响[D];山东大学;2011年

本文编号：2592948