中性粒细胞抑制人单个核细胞释放TNF-a及其机理的研究

发布时间：2020-03-31 16:53

【摘要】： 肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）是一种由机体单核巨噬细 胞释放的致炎细胞因子，可加强机体的抗感染能力。然而，在细菌等致病因子 活化下，机体可释放过量的TNF-α，其潜在的毒性作用成为促使感染性休克发 生和发展的一个重要因素。本教研室发现人的中性粒细胞可以抑制吞噬细胞 U937释放TNF-α。在此基础上，本实验研究进一步探讨人的中性粒细胞（poly- morphonuclear leukocytes，PMNs）对人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）释放TNF-α的影响及其作用的初步机理。 实验采用新鲜采集的健康供血者的外周静脉血，以葡聚糖沉淀和密度梯度 离心法分离其PMNs和PBMCs，将PMNs细胞与PBMCs细胞按2∶1的数量比 与脂多糖共同培育，然后分别采用酶联免疫吸附法测定培养上清的TNF-α浓度 和用流式细胞术测定结合荧光标记脂多糖的单核细胞的百分率及单核细胞表面 平均荧光强度。实验结果如下： 1、PBMCs在细菌脂多糖刺激下释放TNF-α，而PMNs在细菌脂多糖刺激 下不释放TNF-α。PMNs可以抑制PBMCs释放TNF-α（P＜0.05）。PMNs与PBMCs 按数量比2∶1共育时，PMNs的平均抑制率为45％。而红细胞不具有类似PMNs 的抑制作用（P＞0.05），显示PMNs的抑制作用是具有细胞特异性的。 2、经多聚甲醛固定的PMNs仍具有上述的抑制作用（P＜0.05），说明PMNs 的抑制效应是通过与PBMCs的相互接触发挥的，并提示PMNs表面存在发挥 该抑制作用的效应分子。 3、丝氨酸蛋白酶抑制剂eglin C明显抑制PBMCs释放TNF-α（P＜0.05）。 当PBMCs与PMNs共育时，eglin C并不能翻转PMNs对PBMCs分泌TNF-α 的抑制作用，但PMNs对PBMCs分泌TNF-α的抑制率在未加eglin C时较加入 eglin C时为高（P＜0.05）。 4、使用荧光标记细菌脂多糖及流式细胞术观察PMNs是否影响单核细胞与 之的结合。结果显示，结合荧光标记脂多糖的单核细胞的百分率其平均表面荧 光强度均不受PMNs影响（P＞0.05），，单核细胞与脂多糖结合随时间延长而增加 （P＜0.05）。因此，PMNs并非通过阻断单核细胞与脂多糖结合而发挥抑制效应的。 上述结果表明，PA4NS可抑制人PBMCS释放TNF。，其机理可能是通过 细胞间的相互接触，Ph4NS干扰了脂多糖激活PBMCS的信号转导过程，抑制细 菌脂多糖对其的活化，从而下调M咐的释放。本实验结果提示，PMNs对PBMCs 的抑制作用可能代表着机体调控’I’N’F－a生成的一种负反馈调节，对阻止感染性 休克的发生及发展具有一定的病理生理学意义。
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2000
【分类号】：R363

【参考文献】

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2 陈祥银;中性粒细胞的生理与病理生理[J];基础医学与临床;1992年03期

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本文编号：2609329