MBP对PBMC产生IFN-γ、NO和CD11c表达的影响

发布时间：2020-05-15 10:52

【摘要】： 中枢神经系统(central nervous system，CNS)脱髓鞘性疾病是神经系统常见病，其病因和发病机制迄今尚未完全清楚。目前认为它是由特异性抗原介导的 CNS 的自身免疫性疾病，其发病可能与病毒感染有关。其发病机理推测与其他自身免疫性疾病相似，是自身抗原、非特异性T细胞活化和T细胞介导的炎症反应共同参与了脱髓鞘疾病的发病过程。髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein ，MBP)既是神经髓鞘的重要成份，又是CNS脱髓鞘疾病的重要抗原。用MBP免疫动物诱发的实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergicencephalomyelitis，EAE)是T细胞介导的CNS 自身免疫性疾病，在临床表现、免疫病理和免疫化学方面与人类CNS 脱髓鞘疾病有很多相似之处，因而是研究CNS 脱髓鞘病的经典动物模型。用 EAE 易感动物的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear，PBMC)和树突状细胞(dendritic cell，DC)等在离体条件下与MBP共培养，可用于探索和研究它们在EAE中的作用。DC作为机体内功能最强的抗原递呈细胞(antigen presenting cell，APC) ，目前已知其具有启动免疫应答和免疫耐受双重作用，参与机体免疫反应的调节，其在自身免疫性疾病发病中的作用已受到人们的重视。近年来的研究发现，DC具有致病性和促恢复性的双重作用，通过体外培养 MBP对 PBMC、DC产生 IFN－Y、NO和 CDll。的表达影响环境的调控可以改变DC 的功能或使其定向分化。因为DC 的免疫功能具有多样性和易变性，所以有可能成为治疗自身免疫病的突破口。但DC在CNS脱髓鞘疾病中的作用，国内外在此领域的研究起步较晚，关于DC在EAE发病中的作用国内尚未见报道。本实验采用体外细胞培养的方法，分离EAE 易感性BALB／C 小鼠PBMC 和DC，在体外与MBP 共培养。观察经MBP 活化的 PBMC 分泌IFN—Y以及NO 的含量变化，以证实T 细胞非特异性活化的参与机制在CNS 脱髓鞘性疾病发病中的作用。通过检测经＼1 P 活化的 P B ＼IC 和 D C 中 D CI 的标志性抗原 C DllC 的表达，以观察C＼S 脱髓鞘性疾病过程中DC 前体细胞向DCI 分化变化。为设法使DC 前体细胞定向分化或者改变其功能，促进 CNS脱髓鞘性疾病的恢复，或减少复发提供实验资料。本研究的主要结果如下：①经 MBP 刺激的 BALB／C ／J’鼠 PBMC 分泌IF＼－b，的含量明显增加，实验组为43．83士6．06 pg／ml，对照组为ZS．52土2．18pg／。1，二者具有极显著性差异（P＜0．01）。②i4 MBP 刺激后的 BALB／C ’］＼鼠 PBMC 分泌＼0 的含量明显增加，实验组为 180．76土20．75 11 mol／L，对照组为 9 5．61土 13．0 9 u mo／L，h者具有极显著性差异（P ＜0．of）。③经 MBP 刺激的 BALB；／C ／J’鼠 PBMC CDllC 的表达明显增强，实验组CDllC 平均荧光强为 15．16士1．92 D，对照组为 8．76 士 1．70 D，，二者具有极显著性差异卜＜ 0．01）。④＠ MBP刺激的 BALB／C 小鼠 DC CDllC 的表达明显增强，实验组平均荧光强度为 17．41．62 D，对照组为 9．13士0．66 D，二者具有极显著性差异（尸＜0．01）。⑤去除 DC 的 BALB／C 小鼠脾单个核细胞，MBP 刺激后其 CDI IC 的表达无明显增强，实验组平均荧光强度为 S．86士 1．SS D，对照组为8．69上L．12 D，二者无显著性差异（尸＞O．05）。 MBP对PBMC、DC产生IFN．Y、NO和CDllc的表达影响本实验提示：①被诱导抗原MBP激活的EAE易感性BALB／C 小鼠 PBMC 分泌 IF＼－Y 和 NO增加。②EAE易感性BALB／C 小鼠DC 前体细胞与MBP共培养可以促进其向DCI 亚型分化。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R363

【参考文献】