LEPTIN单克隆抗体的制备及其应用性探索

发布时间：2020-05-16 22:21

【摘要】： 以重组人leptin作为抗原，利用杂交瘤技术成功制备了3株鼠抗人leptin McAb，对其性质进行了系统的分析，并对其在诊断中的应用进行了初步探索。 3株特异性较好，效价和亲和常数较高。3株McAb均为IgGl亚类，ELISA检测腹水效价为10~(-6)～10~(-7)，特异性较好，亲和常数（Ka）分别为1.67×10~9L/mol，3.0×10~8L/mol，， 7.5×10~8L/mol。采用常规的免疫方法制备了兔抗人leptin多克隆抗体，特性分析表明特异性较好，效价较高。经DEAE-FF纯化后的血清，用过碘酸纳法与辣根过氧化物酶进行了标记，方法学结果表明，标记后的酶标抗体质量较好。以单克隆抗体作为固相抗体，多克隆抗体为酶标抗体，建立了一种检测人血浆中 leptin的双抗体夹心酶联免疫吸附分析方法（ELISA）。此法的灵敏度为16ng/ml，批内变异系数为8.36％（n=10）批间变异系数为10.22％（n=5），测得回收率为92.8～106％。
【学位授予单位】：上海医药工业研究院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2000
【分类号】：R392-33

【参考文献】