大鼠脊髓内5-HT1A受体的分布及其在痛信息传递中的作用

发布时间：2020-05-19 17:50

【摘要】： 脊髓背角是外周伤害性信息初级传入纤维的终止部位，也是下行抑制系统的主要作用部位之一，在外周伤害性信息的传递及调控中具有重要作用，脊髓前角则与运动功能密切相关。 5-羟色胺（5-HT）是中枢神经系统内重要的神经递质，在多种功能活动中发挥着重要的作用，这些功能活动都由其受体介导。迄今已发现5-HT受体有7种类型14个亚型，它们在神经系统中的分布各具特点，且与自身介导的功能密切相关。目前，5-HT受体在神经系统中的分布只有一些配体结合的放射自显影及少量原位杂交和免疫组织化学研究的结果。5-HT_(1A)受体是发现较早的5-HT受体亚型，药理及生理学研究证明它与感觉、运动和植物神经功能等有密切关系。5-HT_(1A)受体在脑内的分布较广泛，但对其在脊髓中的分布状况缺乏详细的形态学资料。既往用放射自显影方法的研究结果证实 5-HT_(1A)受体主要位于脊髓背角。还有研究结果提示5-HT_(1A)受体阳性神经元主要位于脊髓前角，这些结论间存在着矛盾。同时，对于5-HT_(1A)受体在脊髓中的作用也众说纷纭。本研究采用原位杂交组织化学技术、反义寡脱氧核苷酸方法及行为药理学方法，对5-HT_(1A)受体在脊髓中的分布及其在伤害性信息传递过程中的作用进行了探讨，研究内容包括以下两方面： 1．大鼠脊髓内5-HT_(1A)受体mRNA阳性神经元的分布合成针对大鼠5-HT_(1A)受体mRNA的寡核苷酸探针，用3’末端标记法第四军医大学硕士学位论文及b－‘勾dATP标记，进行原位杂交反应，用放射自显影方法使结果可视化。结果显示：5－HTIA受体mRNA阳性神经元见于脊髓灰质各层，以脊髓背角浅层（I、11层）最为密集。 2．5－HTI＾受体反义寡脱氧核昔酸探针降低大鼠脊髓5－HTIA受体的表达并减弱足底注射蜜蜂毒诱导的自发痛行为反应鞘内注射针对5－HT；＾受体亚型mRNA的反义寡脱氧核苦酸（ASO人以 WestCth BIOt方法检测给予 5－HTIA受体 ASO不同时间后，脊髓 5－HTIA受体的表达变化；用行为学实验观察鞘内给予5－HTIA受体ASO对足底注射蜜蜂毒（BV）引起大鼠痛行为反应的影响。Western Blot结果显示鞘内注射 5－HTIA受体ASO降低了脊髓5－HTIA受体蛋白的表达，连续给予4天后降低至最低值；鞘内注射5卫T［A受体正义寡脱氧核昔酸侣O）则对脊髓5爿T；A 受体蛋白的表达无明显影响。缩足反射是动物的一种自发痛行为反应，，行为学实验观察到鞘内注射5－HT＊受体ASO门次／天，4天）使BV诱导的缩足反射次数明显减少，即ASO显著降低BV引起的自发痛反应。而注射生理盐水及5－HTIA受体SO对大鼠足底皮下注射BV引起的原发性和继发性痛敏没有明显影响。鞘内注射5书T IA受体ASO对大鼠足底皮下注射BV后，伤害性机械性刺激和热刺激引起的双后肢缩足潜伏期的变化（痛敏）没有影响。上述结果表明鞘内注射5－HTI＾受体ASO可抑制BV引起的大鼠自发痛反应，但对BV诱发的原发性、继发性热和机械性痛敏无明显影响。上述作用可能与脊髓5E 受体ASO明显减少5羽受体蛋白的表达有密切关系，提示脊髓背角的5－HTIA受体可能参与痛信息的传递过程。
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2001
【分类号】：R338

【参考文献】