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重组乙型肝炎大S表面抗原-Fc融合蛋白(rLHBs-Fc)的表达和活性检测

发布时间:2020-05-23 02:48
【摘要】:乙型肝炎是一种严重危害人类健康的传染性疾病,有三分之二的慢性感染者会发展成为肝硬化、肝癌等恶性肝疾患。目前,对HBV的感染主要采用免疫接种的方式来预防和控制。其中HBsAg是构建疫苗的核心成分,但病毒的变异使得现有疫苗对HBV的预防存在着困难。现在,人们普遍使用α干扰素和拉米夫定等抗病毒药物对慢性感染病人进行治疗,但疗效不是很理想。治疗性乙肝疫苗有望成为一种廉价,高效的治疗方法。因此,人们更多地通过改变抗原构成,来提高机体免疫应答。本研究构建了preS1/preS2/S(‘a’决定簇)与人IgG1 Fc融合基因稳定表达载体,旨在通过增加前S抗原来激发更高的免疫应答;而连接的Fc段促进体内含有Fc受体的细胞对抗原的递呈,从而促进T细胞和B细胞的免疫作用。通过对纯化的蛋白进行部分生物活性的检测,结果表明,rLHBs-Fc蛋白具有一定的抗原性和免疫原性:①各个表位具有抗原性;②采用HRP-羊抗人IgG1(H+L)进行的免疫印迹实验证实融合蛋白含有IgG1Fc;③免疫的小鼠可以产生特异性抗体。
【图文】:

电泳图,测序,载体,电泳


图1.2PUC19一rLHBs测序载体的电泳测序结果经过与设计的基因序列aa(219位碱基a一g),,Ser(744位碱比对完全正确,结果如下(标准图见附

测序,质粒,条带,位置


图1.1rLHBsAg基因的PcR扩增产2puC19一rLHBS测序载体的构建与鉴定对小量提取的质粒pUC19一rLHBs因条带位置与预计相符,rLHBS约为8步鉴定酶切正确,送去测序(图1.2)。左图M.1.Hi(860b2.质洲绷明您阴侧驯
【学位授予单位】:中国人民解放军军事医学科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R392

【共引文献】

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本文编号:2677021

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