PS-SOD脂质体携载SOD在肺内转运的实验研究

发布时间：2020-07-10 19:54

【摘要】： 目的 通过对肺表面活性物质(PS)利超氧化物歧化酶(SOD)结合的研究，探索一条提高超氧化物歧化酶在肺内转运并增强抗氧化损伤的途径，减轻体外循环、高氧及一氧化氮对肺的损伤，为进一步应用于临床提供理论依据。方法 1 通过半边膜渗透法(Clark法)，将超氧化物歧化酶进行异硫氰酸荧光素(FITC)工《荧光标记，用紫外分光光度计计算荧光素与超氧化物歧化酶的结合率(F／P)，并应用超氧化物歧化酶检测试剂盒分析标记前后超氧化物歧化内酶的活性；2 通过旋转蒸发法将超氧化物歧化酶与肺表面活性物质一起构建PS-SOD脂质体，电镜测定PS-SOD脂质体的粒径大小，表面张力仪检测PS-SOD脂质体的表面张力，并检测脂质体中超氧化物歧化酶的包封率和超氧化物歧化酶的活性；3将上述方法制备的PS-SOD脂质体经气管注入大鼠肺中，分别于术后2h和24h处死大鼠，取出肺组织，电镜观察脂质体在肺泡上皮的形态特征；冰冻切片后通过荧光显微镜进行荧光强度的定性、定量分析；同时，对大鼠肺进行灌洗和制备组织匀浆，并对灌洗液和组织匀浆液进行超氧化物歧化酶的生化活性测定，设立对照组，应用SPSS10.0软件包对结果进行统计分析。结果 1 超氧化物歧化酶可以通过Clark法成功的被FITC标记，而活性不受影响，F／P值为2.76；2 通过旋转蒸发法，可以将超氧化物歧化酶与肺表面活性物质成功构建PS-SOD脂质体，包封率为40％，PS-SOD脂质体的表面张力较天然肺表面活性物质无明显下降，超氧化物歧化酶的抗氧化活性在脂质体制备后无明显改变；3 电镜显示脂质体可分散或聚集存在于肺泡上皮细胞中，荧光照片定量、定性分析结果显示，PS-SOD脂质体组中肺组织FITC荧光强度高于其他对照组，PS-SOD脂 论文：＊s．s＊D脂质体携载S＊D在帅山V坷的实验研究 质体组肺灌洗液和肺组织匀浆的超氧化物歧化酶活性高于其他对照 组。结论1利用半透膜渗透法，可以成功火观FITC对超氧化物歧化 酶的标记，而超氧化物歧化酶的活性无lWM改变。2．利用反向蒸发 法，可以利用天然肺表面活性物质与超氧化物歧化酶成功制备高活性 的 PS－SOD脂质体，而各组分的性质无明I，l＼L＆变。3．利用制备的 PS－ SOD脂质体，可以成功携载超氧化物歧化地实现向肺泡上皮细胞的 转运，并延长超氧化物歧化酶的作用时闪，在肋表面活性物质发挥作 用的同时又增强超氧化物歧化酶在肺内的1，＼讽化作用。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R341

【参考文献】

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本文编号：2749380