肠易激综合征大鼠模型结肠树突状细胞生物学行为体外研究

发布时间：2017-03-30 22:30

  本文关键词：肠易激综合征大鼠模型结肠树突状细胞生物学行为体外研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨Runx3、TGF-β1及树突状细胞与肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)发病中的相关性,进而为IBS的发病机制提供线索。方法:通过乙酸灌肠加束缚应激方法建立肠易激综合征大鼠模型。从每只大鼠中提取一小段结肠在电镜观察树突状细胞的形态。然后运用密度梯度离心法分离出大鼠结肠粘膜固有层的树突状细胞,分离出来的树突状细胞在体外培养12天后再经过免疫磁珠分选器分选。再运用siRNA技术转染RUNX3基因启动子发卡样特异性干扰寡核苷酸序列(shRNA-RUNX3)至分离出的树突状细胞。继续培养7天。分别进行流式细胞仪检测DC表型、运用Western blotting检测TGF-β1及Runx3蛋白的表达情况。结果:1、在不同扩张容量下,比较两组大鼠的AWR评分及腹壁肌电活动,发现模型组大鼠AWR评分较对照组明显增加,提示其内脏敏感性增加(P0.01)。2、大鼠派氏结DC表面OX62的表达率IBS模型组大鼠明显高于正常对照组的(P0.05)。3、培养的树突状细胞通过倒置荧光镜观察符合DC的结构特点。4、正常组DC的表面分子OX62、CD80、CD86、MHC-II的表达率均明显低于IBS组,但转染组与未转染组之间无明显差异。5、Western blotting结果显示转染组Runx3蛋白的表达量较未转染组明显减少。转染组与未转染组TGF-β1蛋白表达量没有明显差异。结论:1、利用乙酸灌肠加束缚应激的方法来建成的IBS动物模型是符合IBS的内脏敏感性机制的,这非常适用于关于IBS的试验研究。2、IBS的发生与发展可能有树突状细胞的参与。3、TGF-β1和Runx3在肠易激综合征发病中存在的作用有待进一步研究。4、Runx3基因有可能通过其他传导途径来影响树突状细胞在肠易激综合征中的作用。
【关键词】：肠易激综合征 树突状细胞 RUNX3 TGF-β1 shRNA
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R574.4;R-332
【目录】：

• 缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 第1章 前言10-14
• 第2章 材料和仪器14-16
• 第3章 步骤和方法16-29
• 第4章 结果29-35
• 第5章 讨论35-38
• 第6章 结论38-39
• 参考文献39-42
• 综述42-50
• 参考文献47-50
• 在读期间发表文章50-51
• 致谢51-52

【参考文献】

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1 曾雪爱;洪炎国;黄俊山;;RNA干扰技术在生物医学领域中的应用[J];生物医学工程与临床;2011年02期

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本文编号：278262