人参总皂甙对D-半乳糖衰老模型大鼠海马生长抑素阳性神经元表达的影响

发布时间：2020-08-07 05:45

【摘要】： 有关衰老的研究在基础和临床医学中都是一个被重视的课题。随着社会人口老龄化，有关衰老尤其是脑衰老的研究，已经成为研究的热点。在探讨脑的衰老变化机理研究中，脑内生长抑素（Somatostatin，SS）的变化是人们颇为关注的神经肽之一。SS为环状14肽，与学习记忆密切相关，目前研究已确认，海马结构内的SS神经元与垂体前叶生长激素的分泌和释放活动没有直接关系，而与学习、记忆密切相关，具有抗遗忘作用，是记忆的物质基础，已有研究资料表明，老龄大鼠海马SS水平低下，SS阳性神经元密度降低。人参总皂甙是传统中药人参的主要有效成分之一，具有人参的主要生理活性，近年来有关人参总皂甙抗衰老研究十分热门，已有研究资料表明，人参总皂甙可以有效延缓神经系统机能的老龄性退变。然而，有 —— 关人参总皂贰对衰老大鼠海马内SS神经元作用的研究，国内外未见报道。本课题采用卜半乳糖亚急性中毒衰老模型大鼠，应用免疫组化ABCfk检测大鼠海马SS阳性神经元分布，观察人参总皂贰对衰老大鼠海马生长抑素变化的影响，探讨人参总皂贰的抗衰老作用。一、材料和方法（一）动物分组 18只Wistar大鼠（雄性，体重265士369，四月龄），随机分为对照组、造模组和给药组三组，每组6只。（二）衰老模型的建立及给药造模组：皮下注射卜半乳糖（48mg／kg”d）6周。给药组：皮下注射卜半乳糖N8峪八g”d）同时给予人参总皂贰灌胃（50mg／kg”d）6周。对照组：皮下注射生理盐水u 八g’d）6周。（三）取材、固定、切片各组大鼠经戊巴比妥钠（46mg／kg）腹腔注射麻醉，开胸，经左心室4％多聚甲醛缓冲液灌注取脑，入4％多聚甲醛缓冲液后固定6－8小时，常规脱水、浸蜡、包埋，Leitz切片机鼠脑冠状位连续切片，片厚5 u m。（四）免疫组他BC法检挪S 采用华美公司提供的全组分ABC免疫组化检测试剂盒，一抗为兔抗SS 血清（二军大神经生物学教研室），＊ 1500稀释，结合时间：湿盒中 4 oC过夜。其余操作按试剂盒说明书进行。 DAB染色、复染封片，01y晌us光镜下观察。一2一 —— ABC法染色的同时，分别做阳性对照和阴性对照。（五）图像分析每个标本选择2张相同断面的切片，在olympus BHZ显微镜10X 10下，用JVC Digital Ca。era分别对各组切片的m、CA3、CA4＆DG区进行采样（采样过程中保持光源亮度恒定，以保证各组切片光密度的可比性），采样结果输入计算机，应用HPIAS－1000（高清晰度病理图文分析系统， High resolution Pathological Image Analysis Syste。，同济医科大学）进行图像分析，测定SS阳性神经元的积分光密度。在olympus显微镜下用测微尺计数SS阳性神经元（个／m。z）。（六）数据处理及统计分析数据以平均数士标准差表示，用SPSS 8．0统计软件进行单因素方差分析（one－。ay ANOVA）。二、结果和讨论（一）各组大鼠海马SS免疫阳性神经元定量分析结果比较表1 三组大鼠海马SS阳性神经元计数（个／mmz）组别n CAI CA3 CA4＆DG 对照组6 89．17士16．55All6．33士11．83A 183．67士23．18A 造模纽 6 35．00士4．94““58．17is．13““68．33士8．89”“ 给药组 6 79．32土8．94八 107．17土13．”凸 180．弧士ZI．22凸注：幼示与对照组比较，P＜0．of ；八示与造模组比较，P＜0．of －3－ —— 表二三组大鼠海马SS免疫阳性神经元积分光密度组别n CAI CA3 CA4＆DG 对照组6 12．70士l．33 12．62土l．69 13．48士l．58 造模组6 6．99土0．61““6．93土0．34““7．20土0．44““ 给药组6 12．25士1．43八 12．47土1．46么 12．59士1．36A 注：林示与对照组比较，P刃．01；A示与造模组比较，P吻．01 实验结果显示，给药组与造模组比较，海马各区SS阳性神经元数目和积分光密度均有显著增加（P＜0．01）。给药组与对照组相比，海马各区SS阳性神经元数目和积分光密度无统计学差异（P＞0．15）。提示人参总皂贰对卜半乳糖加速衰老模型大鼠海马SS能神经元有较好的保护作用。二四－半乳糖致大鼠亚急性衰老模型在抗衰老研究中的应用 D－半乳糖致大鼠亚急性衰老模型是以衰老自由基代谢紊乱学说为理论基础建立的一种简便实用可靠的衰老动物模型，在国内外抗衰老研究中得到广泛应用。本实验结果表明衰老模型大鼠海马内SS阳性神经元数目及积分光密度均比正常对照组显著减少（p＜0．of），与己有报道一致，从一定程度上证实了D－半乳糖致大鼠衰老模型是一种简便、优良的衰老模型。（三）海马SS＄龄变化与认知障碍的关系海马结构内的SS阳性神经元与学习、记忆密切相关。SS有利于记忆的强化，具有抗遗忘作用，是记忆的物质基础。已有研究资料表明，衰老大鼠海马SS水平低下，SS阳性神经?
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2001
【分类号】：R339.3

【参考文献】