神经干细胞在海人酸毁损大鼠海马中的迁移和分化

发布时间：2020-08-10 16:21

【摘要】：研究背景神经干细胞是一种未分化细胞，具有自我更新、增殖的特性和分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的潜能。目前已经证实，哺乳动物胚胎期的大部分脑区和成年期的脑室下区、海马齿状回都含有丰富的神经干细胞。这种细胞能依赖于无血清培养液中丝裂原的感应而增殖，其它的原代细胞在这种培养液中不能存活。因而，可以在体外培养、扩增并获得高纯度的神经干细胞。研究表明将体外扩增的神经干细胞移植到成年鼠脑内，发现这些被移植的细胞在宿主脑内能很好地存活，并向周围迁移，最后分化成同移植部位宿主细胞表型类似的神经细胞，而且与周围的神经元形成突触联系。神经干细胞具有分化成移植部位局部特异性细胞的能力，是损伤或病变脑组织细胞移植的理想的组织来源，为神经系统退行性疾病和颅脑损伤的治疗开辟了一条广阔的道路。本课题以海人酸特异性毁损成年大鼠海马CA1区锥体细胞，将来源于胎鼠海马的神经干细胞移植于毁损区，观察神经干细胞的存活、迁移和分化。为临床神经干细胞替代治疗做准备。研究目的 1．研究胎鼠脑海马神经干细胞的分离、培养、增殖及分化特点。 2．观察胎鼠神经干细胞移植入海人酸毁损大鼠海马中的迁移和分化情况。研究方法 1．采用无血清培养、单细胞克隆技术及免疫细胞化学方法，观察海马源性神经干细胞的体外扩增和贴壁分化情况。 2．立体定位注射海人酸毁损大鼠海马CA1区锥体细胞。 3．毁损一周后，将Hoechst33342标记的神经干细胞移植毁损区，分别于术后1周、2周、4周、8周取材，利用免疫荧光技术，追踪移植的神经干细胞在毁损侧海马中的存活、迁移和分化情况。研究结果 1．从大鼠胚胎脑海马分离的细胞具有增殖能力，可以传代培养，子代细胞免疫组化显示神经巢蛋白(Nestin)阳性。经含血清培养基培养，贴南京医科大学硕士学位论文壁可分化为微管相关蛋白一2(MAP:)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞。 2.海人酸特异性毁损大鼠海马CAI区锥体细胞。 3.移植的神经干细胞在海马锥体层呈链状迁移，并分化为MAP:阳性细胞和GFAP阳性细胞。研究结论 1.用本方法分离培养的细胞具有自我复制和多向分化的能力，是中枢神经系统的干细胞。 2.立体定位注射小剂量海人酸特异性毁损海马锥体细胞，不影响过路神经纤维。 3.移植的神经干细胞在海马锥体层呈链状迁移，可分化为神经元和星形胶质细胞，大部分神经干细胞分化为星形胶质细胞。
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R329

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