不同来源间充质干细胞条件培养基对内源性衰老细胞作用的比较

发布时间：2020-10-19 15:39

　　 背景:随着经济的发展,人们对美的追求越来越高,抗衰老研究成为当今的研究热点。干细胞是具有自我更新能力和多向分化能力的细胞,间充质干细胞是其中的一种。研究表明间充质干细胞能通过旁分泌作用修复损伤衰老的细胞,但对于不同来源间充质干细胞条件培养基的抗皮肤衰老作用研究甚少。目的:比较人脂肪、羊水、胎盘、脐带来源间充质干细胞条件培养基对自然衰老皮肤成纤维细胞的抗衰老作用。方法:制备人脂肪、羊水、胎盘、脐带4种不同来源的间充质干细胞条件培养基,添加到自然衰老皮肤成纤维细胞中,采用CCK-8法检测细胞活力、β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞衰老率、DCFH-DA探针检测活性氧含量以及q PCR检测p16、p53、COL1、KLOTHO基因表达量。结果与结论:①4种间充质干细胞条件培养基均能提高皮肤成纤维细胞的活力,其中脂肪间充质干细胞条件培养基的效果最好,β-半乳糖苷酶染色率最低;②4种间充质干细胞条件培养基均能降低活性氧含量,脂肪和羊水来源间充质干细胞条件培养基组的活性氧含量最低;③p16和p53在胎盘和脐带间充质干细胞条件培养基组的表达均高于对照组,在羊水来源间充质干细胞条件培养基组的表达较低,脂肪间充质干细胞条件培养基组p16表达显著低于对照组,但p53的表达较高;④COL1基因表达除羊水间充质干细胞条件培养基组外,其他3组均显著高于对照组,KLOTHO基因表达除胎盘间充质干细胞条件培养基组外,其他3组均显著高于对照组,且脂肪间充质干细胞条件培养基组的表达最高;⑤结果显示,4种不同来源间充质干细胞条件培养基能在一定程度上延缓细胞衰老,但作用效果存在差异,其作用机制还有待进一步研究。
【文章目录】：
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文题释义:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 设计
    1.2 时间及地点
    1.3 材料
        1.3.1 样本
        1.3.2 实验试剂与仪器
    1.4 实验方法
        1.4.1 人皮肤成纤维细胞的培养
        1.4.2 衰老皮肤成纤维细胞β-半乳糖苷酶染色
        1.4.3 四种人间充质干细胞的制备
        1.4.4 四种人间充质干细胞条件培养基的制备
        1.4.5 CCK-8法检测细胞增殖活性
        1.4.6 β-半乳糖苷酶染色
        1.4.7 细胞内活性氧水平
        1.4.8 实时荧光定量PCR检测细胞相关衰老基因表达
    1.5 主要观察指标
    1.6 统计学分析
2 结果Results
    2.1 衰老人皮肤成纤维细胞的形态及β-半乳糖苷酶染色结果
    2.2 四种间充质干细胞条件培养基对衰老人皮肤成纤维细胞增殖的影响
    2.3衰老人皮肤成纤维细胞β-半乳糖苷酶染色结果
    2.4衰老人皮肤成纤维细胞活性氧水平
    2.5 实时荧光定量PCR检测衰老基因表达
3 讨论Discussion

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