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ENU诱变获得两例新的稀毛小鼠及其突变基因的染色体定位

发布时间:2020-10-21 04:46
   脱发或秃发是一种常见的人类疾病,在人群中有一定的发病率。脱发有先天遗传性或受后天外部因素影响而形成,如压力、饮食习惯、神经混乱、X光照射、药物引起等。但目前对于脱发的原因知之甚少,由于小鼠和人类基因组的高度同源,因此被毛突变小鼠是研究毛发生长和秃发机理的难得的动物模型,如无毛小鼠和稀毛小鼠。此类突变小鼠通常由自发或诱发突变得来。本文即用ENU诱变获得了两例新的稀毛小鼠并对突变基因进行了染色体定位。本论文的工作由三部分组成。 1.ENU诱变获得两例新的被毛突变小鼠 用DNU(100mg/Kg)腹腔注射18只8-10周龄的雄性DBA/2小鼠(G_0),每周一次共三次;与同品系小鼠配种,在后代小鼠中针对可见表型筛查突变个体。将在后代小鼠(G_1)筛查到的突变个体与同品系配种,若异常表型传代则可能为显性突变;选择表型正常的G_1雄鼠与C57BL/6J配种得F_1,将F1随机互交得到F_2,依据F_2是否有突变鼠出现确定可能存在的隐性突变。结果表明,在352只G_1小鼠中,14只出现异常表型,但均未传代;对30只G_1雄鼠的隐性遗传试验获得2只稀毛突变小鼠,均表现为被毛稀疏、幼鼠生长缓慢;命名为snthr~(-1Bao)及snthr~(-2Bao)。 2.两例新的稀毛小鼠组织学结构的初步研究 分别取稀毛小鼠和正常DBA/2小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑、淋巴结、胸腺和皮肤等脏器,用10%甲醛固定,行石蜡切片,HE染色,观察稀毛小鼠的组织 学结构有无异常。结果发现稀毛小鼠除了皮肤比正常小鼠的薄,毛囊数量少,毛 囊有角化现象外,其它各脏器均无异常。 3.两例新的稀毛小鼠突变基因的染色体定位 用连锁分析法对ENU诱变获得的两例稀毛小鼠(s nthLr-’“aO及:nihr-z‘)的突变 基因进行定位。选择平均分布于小鼠常染色体且在C57BL/6J和DB刀2间有差异 的39个微卫星对B6DZFI互交得到的稀毛F:进行基因组扫描。当扫描了9个微卫 星后发现sn廿『l“aO突变基因与DgMit243的LoD值为7.73。突变基因被定位于9 号染色体。在此基础上又选择了DgMit355和DgMitls两个微卫星进行检测,并 扩大F2的数量至145只。结果,sn廿甘~l“aO与DgMitls间无1例重组,稀毛突变基 因与该微卫星紧密连锁,距着丝点71。M。同理,将sn止Lr-ZBaO突变基因也定位于9 号染色体,与snuir.l腼相近的区域。检索发现sn廿ir,,“aO是一尚未克隆的新基因。 综上,本研究的结果为开发我国被毛突变小鼠品系打下了基础,提供了依据, 为克隆该突变的稀毛提供了必要的研究基础.
【学位单位】:扬州大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2004
【中图分类】:R-332
【部分图文】:

突变小鼠,稀毛,被毛,背部


但质地较正常小鼠粗糙,无光泽,腹部基本无毛;②背部与腹部的被毛都较稀疏,毛比正常小鼠细、软:③背部与腹部基本无毛,8周龄前的小鼠皮肤皱摺显著(见图1)。这两例突变小鼠的3类表型无绝对区别,呈现一个逐渐过渡的状态。3类表型小鼠的尾部皆无毛,触之有粘滞感。F:突变雄鼠的生殖力和突变母鼠产子、带子能力基本正常。解剖这3类表型的小鼠发现均有胸腺和脾,其它器官也无异常发现。

稀毛,脾脏


正常小鼠脾脏HEx400Fig·3PhotomierograPhofnormalmousesPleen(HEX400)

稀毛,毛囊


3结果观察切片发现这两例稀毛小鼠脑、心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏均结构正常,无炎性变化(图2、3);一些免疫器官如胸腺(图4、5)、淋巴结也无明显变化。观察皮肤的切片标本发现稀毛小鼠的皮肤较正常小鼠要薄,毛囊数量明显减少,毛囊有角化现象(图6、7、8)。
【参考文献】

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本文编号:2849658

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