模拟高原缺氧大鼠骨髓细胞EPOR的研究

发布时间：2020-10-25 03:33

　　 目的：高原缺氧时红细胞增多，红细胞适度增多可以改善组织供氧，是缺氧习服-适应的重要机制之一。EPO是体内调节红细胞生成的最重要的糖蛋白，能刺激红系祖细胞的增殖、分化和成熟。一般认为组织缺氧时EPO分泌增加可能是高原缺氧红细胞增多的原因。本文旨在研究模拟高原缺氧时骨髓细胞EPOR的变化，探讨高原缺氧时红细胞增多的机制。 方法：实验用Wistar大鼠，体重150g-200g，雌雄各半。随机分为4组：常氧对照组和模拟缺氧5天、15天和30天组。模拟缺氧组在低压舱实验室模拟海拔5000米缺氧。每天减压23小时，1小时喂食和打扫卫生。提取大鼠骨髓细胞的总mRNA，用RT-PCR方法检测4组大鼠骨髓细胞EPORmRNA的表达。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，进行密度扫描，并以共同扩增的β-actin蛋白基因作为内参照，二者扩增带密度之比表示EPORmRNA表达水平。用~(125)I-EPO与骨髓密度分离细胞(ρ＜1.077g／ml)进行放射性配体受体结合实验，测定各组大鼠骨髓细胞表面EPOR的数量和亲和力的变化。同时用瑞氏染色观察了各组大鼠骨髓像。 结果：1．缺氧5天，15天大鼠骨髓细胞EPOR基因表达水平显著高于对照组，缺氧30天则接近了对照水平。2．缺氧5天的大鼠骨髓有核细胞EPOR亲和力是升高的，而缺氧15天和30天大鼠的骨髓有核细胞EPOR亲和力是减小的。EPOR的数量在整个缺氧过程中呈现增高的趋势。3．骨髓像观察到缺氧5天大鼠骨髓红系计数比例高于对照，缺氧15天和30天骨髓淋巴系计数比例高于对照，缺氧30天骨髓粒系计数比例低于对照。 结论： 1．缺氧可调节大鼠骨髓细胞EPORmRNA的表达，缺氧5天与缺氧15 天大鼠骨髓细胞 EPOR mRNA的表达与对照组相比差异显著，缺氧 30天与 对照组无显著性差异。 2．骨髓细胞表达高亲和力的EPOR（Kd值为2960PM），缺氧5天的 大鼠骨髓有核细胞 EPOR亲和力是升高的，而缺氧 15天和 30天大鼠的骨髓 有核细胞EPOR亲和力是减小的。EPOR的数量在整个缺氧过程中呈现增高 的趋势。测得的细胞表面EPOR数目与EPOR mRNA表达量在高原缺氧过 程中的变化是相似。EPO－EPOR系统是参与调节红细胞生成的最主要因子， 高原缺氧后期红细胞的增多可能有其他因素的参与。 3．缺氧对大鼠骨髓像的影响并不仅限于红系，其对粒系和淋巴系比例 的改变也有影响。缺氧还影响了骨髓细胞的形态。这些可能是组织对缺氧过 程的适应性改变。
【学位单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2002
【中图分类】：R363
【文章目录】：
英文摘要
中文摘要
论文正文 模拟高原缺氧大鼠骨髓细胞EPOR研究
    前言
    第一部分 模拟高原缺氧大鼠骨髓细胞EPOR基因表达的研究
        材料与方法
        结果
    第二部分 模拟高原缺氧大鼠骨髓细胞EPOR亲和力及数量的测定
        材料与方法
        结果
    第三部分 模拟高原缺氧大鼠骨髓像改变的观察
        材料与方法
        结果
        讨论
    结论
    照片
    参考文献
    致谢
文献综述 EPO-EPOR系统与缺氧
    参考文献

【引证文献】

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1 穆秉桃;慢性高原病骨髓单个核细胞及上清液IGF-1和IGF-2的表达研究[D];青海大学;2011年

2 曹蕾;“高住低练”对大鼠骨髓促红细胞生成素受体的影响[D];湖南师范大学;2006年

3 皮亦华;高住低训促进大鼠红系造血的研究[D];湖南师范大学;2006年

本文编号：2855403