FISH和基因高分辨物理定位的研究

发布时间：2020-10-25 05:17

　　 分子细胞遗传学的问世，弥补了常规细胞遗传学和分子遗传学应用于人类基因组研究的局限性，特别是荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，FISH)技术的建立、改进与发展，为遗传病和人类基因组研究提供了重要的手段，使染色体结构和数目异常的检测，以及基因定位等工作向前迈进了一大步。 本文在前硕士论文工作的基础上，在分子细胞遗传学领域又作了新的探索。 用染色体特异性DNA探针进行FISH，是目前分析常规显带不能识别的微小标记染色体的主要技术。本文首先进行G显带，检测出一例罕见的因性腺发育障碍而原发闭经的女性病人的核型为46，X，del(Xq24)(7.1％)／47，X，del(Xq24)，+mar(81.4％)／48，X，del(q24)，+mar，+mar(7.1％)／49，X，del(Xq24)，+mar，+mar，+mar(1.4％)／50，X，del(Xq24)，+mar，+mar，+mar，+mar(1.4％)，其标记染色体形态各异，并初步提示为Xq24→ter片段。然后，分别采用X染色体特异性探针和X染色体α卫星着丝粒探针杂交，证实额外的数目不等的标记染色体为含有着丝粒的X染色体片段或着丝粒环，可能为X染色体长臂末端断片重新获得有功能的着丝粒复制(正常或异常)所致，而且直接证据表明，卵巢早衰和性腺发育异常的基因位于Xq24，该基因断裂或基因位置改变导致了患者的异常表型。 为了解非整倍体的真实发生率及其发生机制，本文以X染色体α卫星DNA探针进一步检测出正常精子中X染色体的二体型频率为0.208％，同时，建立了一种保持精子基本形态的胰酶去凝聚的方法，为目前国内尚未开展的
【学位单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：1997
【中图分类】：R394;Q789
【部分图文】：

核型:具有一条正常的X染色体和一条长臂缺标记染色体。大小箭头分别示Xq24断裂点位置和则形成大小不同的环状(图3).由于所有etr缺失，而且根据带型分析，初步考虑标断片.进一步仔细观察分裂相，发现一小片段，与来源的染色体间尚有细丝状肯定标记染色体为X染色体长臂末端片段.们的推测，采用人X染色体特异性描绘一PCR扩增而获得，PCR片段约100bp一3Kb(以用该探针杂交，被描绘的染色体同时ni一FITC检测并放大信号.患者染色体标色体均被涂成黄绿色，同时显示R带带型一条为长臂末端缺失的X染色体XPter一q24

inter一Aul一PCR扩增的x染色体描绘探针与患者染色体标本FslH体呈黄绿色，同时显示类似于R带的带型;X染色体断裂4，其它染色体呈PI复染的桔红色;标记染色体也显示黄绿色.论上讲，如果仅仅为没有着丝粒的染色体片段，在细锤丝的牵拉，此断片多会丢失，不应稳定存在。所以，有着丝粒成分，因此，我们进一步采用地高辛标记的p果显示，X染色体着丝粒处及小的标记染色体均显示细胞核中也可见3个红色荧光点(图7)，证实额外的标臂末端断片，即Xq24一ter，并获得了X着丝粒成分。

胰酶去凝聚的精子:头部膨胀呈园形，尾部仍存在(Giemas染色)(40、
【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 林建成;妊娠时血清甲胎蛋白水平检测的临床评价[J];蚌埠医学院学报;2002年03期

2 王树玉,贾婵维,任国庆;自然流产的优生咨询[J];北京医学;2002年04期

3 刘延龄;进行性肌营养不良一例报告[J];包头医学;2002年03期

4 王智婷;翟玉霞;;373对自然流产夫妇的细胞遗传学分析[J];滨州医学院学报;2010年04期

5 高春生 ,施惠平 ,叶丽珍 ,石玉平 ,马绍武 ,刘淑敏 ,王玉梅,程在玉;染色体畸变的微细胞遗传学研究[J];当代医师杂志;1996年02期

6 段超,黄慧;荧光原位杂交技术及其在医学临床中的应用[J];湖北民族学院学报(医学版);2000年02期

7 张爱萍;张学红;柳立军;王瑞艳;刘琨;;301例染色体异常男性的生殖状况[J];甘肃科学学报;2009年02期

8 熊艳,王仁礼;进行性肌营养不良症携带者基因诊断的研究[J];国外医学(计划生育分册);1999年02期

9 葛玲;苏琦;;比较基因组杂交在白血病和淋巴瘤研究中的应用[J];国际输血及血液学杂志;2006年04期

10 何平,陈保生;脂蛋白脂酶基因与apo C-Ⅱ基因变异[J];国外医学(分子生物学分册);1995年01期

相关博士学位论文 前10条

1 翟雷;集缩素蛋白在HeLa细胞染色体集缩过程中作用的研究[D];东北师范大学;2011年

2 姜淑梅;小冰麦异附加系TAI-27中异附加中间偃麦草染色体文库构建及抗病基因研究[D];东北农业大学;2003年

3 徐伟珍;常染色体显性遗传“珊瑚状”核性白内障的分子遗传学研究[D];浙江大学;2004年

4 余舜武;荧光原位杂交和分子标记在水稻和小麦种质资源研究中的应用[D];华中农业大学;2002年

5 高松源;生肌调节因子在横纹肌肉瘤中的表达与DNA倍体、融合基因的相关性研究[D];天津医科大学;2004年

6 郭英;滤泡性淋巴瘤形态、免疫表型及发病机理的研究[D];第四军医大学;2005年

7 熊志勇;栽培稻及疣粒野生稻基因组的比较荧光原位杂交研究[D];武汉大学;2004年

8 李湘阳;杉木单染色体的PCR扩增和SCAR分子标记的开发[D];南京林业大学;2003年

9 轩淑欣;荧光原位杂交技术在大白菜染色体基因定位中的应用研究[D];河北农业大学;2006年

10 徐进;杉木分子细胞遗传学研究[D];南京林业大学;2006年

相关硕士学位论文 前10条

1 黄超;栉孔扇贝BAC克隆的共定位及物理图谱相关contig验证研究[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2011年

2 符芳;微阵列比较基因组杂交技术在诊断和产前诊断不平衡染色体畸变中的应用[D];广州医学院;2010年

3 杜文津;DNA微阵列技术对DMD基因缺失检测的基础与临床研究[D];第四军医大学;2002年

4 魏清柱;图像分析系统在检测细胞核DNA含量与倍体中的应用[D];暨南大学;2002年

5 张茜;SYBR Green I 同源基因定量PCR快速诊断21-三体综合征[D];广西医科大学;2003年

6 赖健耀;猪12号染色体显微切割与微克隆研究[D];华中农业大学;2003年

7 吴菁华;多花水仙若干品种类型亲缘关系的分子生物学研究[D];福建农林大学;2004年

8 郭向东;FHIT基因表达下降与食管癌相关性的研究[D];山东大学;2005年

9 王玲;双色实时荧光定量PCR及荧光原位杂交检测唐氏综合征[D];四川大学;2005年

10 梁芳;PP2Ac突变型肺癌相关基因在染色体区域的定位[D];昆明医学院;2006年

本文编号：2855522