不同剂量氢化可的松诱发小鼠药源性脾肾虚证的评价研究

发布时间：2020-10-26 15:46

　　 目的评价氢化可的松诱发小鼠药源性脾肾虚证模型,并探索其物质基础。方法 80只ICR小鼠按随机分为对照组、极低、低、中、高剂量组,每组16只,分别采用灭菌水、0.33、0.66、3.3、12.5 mg/(kg·d)氢化可的松灌胃。每日动态观测小鼠体重,并分别在给药第7天和第14天,检测小鼠抓力、旷场活动度、躯体不同部位红外温度等表征信息。分别于给药第8天和第15天各处死小鼠8只,取脾脏、胸腺、心脏和肾脏称重并计算脏器指数;ELISA检测血清皮质酮(CORT)和促肾上腺皮质激素(ACTH)含量;实时荧光定量PCR检测肾上腺StAR、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1、Cyp11b2 mRNA表达;Western Blot检测肾上腺LDLR、SRBI、StAR蛋白表达。结果与对照组同期比较,低、中剂量组4～14天体重下降(P0.05),极低剂量组7天尾部最低温度、StAR、Cyp21a1 mRNA表达,14天头部最高温度、躯干平均温度、尾部最低温度以及ACTH含量、LDLR、StAR蛋白表达下降(P0.05,P0.01),14天抓力上升(P0.05);低、中、高剂量组7、14天头部最高温度、躯干平均温度、尾部最低温度、胸腺重量和指数下降(P0.05,P0.01);低剂量组7、14天StAR mRNA、LDLR、StAR表达下降(P0.05,P0.01),14天CORT含量、ACTH、Cyp11a1、Cyp11b1 mRNA表达下降(P0.05,P0.01);中、高剂量组7、14天脾脏重量和指数、CORT含量、ACTH、StAR、Cyp21a1、Cyp11b1 mRNA、LDLR、SRBI、StAR表达下降(P0.05,P0.01),14天Cyp11a1、Cyp11b2 mRNA下降(P0.05,P0.01);高剂量组14天体重、旷场活动度下降(P0.05)。结论采用0.66及3.3 mg/(kg·d)氢化可的松持续给药14天可建立稳定的药源性脾肾虚证小鼠模型,可能与其降低肾上腺皮质激素合成酶表达和垂体-肾上腺皮质轴功能有关。
【部分图文】：

７．０专业软件进行作图及统计分析，计量资料采用ｘ±ｓ表示，多组间比较采用Ｏｎｅ－ｗａｙＡＮＯＶＡ方差分析，多组间两两比较，采用ＳＮＫ（Ｓ）检验，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。结果１各组小鼠体重比较（图１）对照组小鼠体重稳定在３１～３３ｇ。与对照组同期比较，低、中剂量组４～１４天体重下降（Ｐ＜０．０５）；高剂量组１４天体重下降（Ｐ＜０．０５）。注：与对照组比较，＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１；下图同图１各组小鼠体重比较表１小鼠肾上腺皮质功能相关基因引物序列基因名称基因库号引物序列产物长度（ｂｐ）β－ａｃｔｉｎＮＭ＿００７３９３上游：５′－ＴＧＴＴＡＣＣＡＡＣＴＧＧＧＡＣＧＡＣＡ－３′下游：５′－ＧＧＧＧＴＧＴＴＧＡＡＧＧＴＣＴＣＡＡＡ－３′１６５Ｃｙｐ１１ａ１ＮＭ＿０１９７７９上游：５′－ＡＣＴＴＣＣＧＧＴＡＣＴＴＧＧＧＣＴＴＴ－３′下游：５′－ＧＣＴＴＧＡＧＡＧＧＣＴＧＧＡＡＧＴＴＧ－３′２０１Ｃｙｐ１１ｂ１ＮＭ＿００１０３３２２９上游：５′－ＧＴＡＴＣＧＡＧＡＧＣＴＧＧＣＡＧＡＧＧ－３′下游：５′－ＧＧＧＴＴＧＡＴＧＴＣＧＴＧＴＣＡＧＴＧ－３′１４０Ｃｙｐ１１ｂ２ＮＭ＿００９９９１上游：５′－ＣＴＧＡＡＣＧＣＴＡＴＡＴＧＣＣＴＣＡＧＣ－３′下游：５′－ＡＧＴＧＴＣＴＣＣＡＣＣＴＧＧＡＡＧＧＴＴ－３′１６０Ｃｙｐ２１ａ１ＮＭ＿００９９９５上游：５′－ＣＴＣＣＧＧＣＴＡＴＧＡＣＡＴＣＣＣＴＡ－３′下游：５′－ＡＣＡ

４天８０．４６±０．１２＊０．９２±０．１９０．２１±０．０６＊中剂量７天８０．２１±０．０５＊＊０．１２±０．０４＊＊０．１３±０．０５＊＊１４天８０．０８±０．０２＊＊０．１２±０．０３＊＊０．０９±０．０１＊＊高剂量７天８０．１１±０．０４＊＊０．０８±０．０１＊＊０．１３±０．０６＊＊１４天８０．０９±０．０１＊＊０．１０±０．０２＊＊０．０７±０．０１＊＊注：Ａ为给药７天；Ｂ为给药１４天图２各组肾上腺类固醇激素合成相关蛋白表达讨论氢化可的松为常用的糖皮质激素药物，因其分子结构最接近生理状态下的可的松且不需要在肝脏转化即可发挥较强的药理作用，因此，在临床被广泛运用。既往以实验动物为对象采用氢化可的松模拟临床给药，从中医学“肾”藏象角度开展了多项疾病、证候模型及其物质基础研究［８－１０］。但是依然存在一些问题：第一，关于氢化可的松造模的用药剂量，不同文献差异较大，检索文献发现小鼠造模期间体内接受氢化可的松总量为３５～６００ｍｇ／ｋｇ（以２００～３５０ｍｇ／ｋｇ居多）。第二，关于氢化可的松造模小鼠的时间和给药方式也存在较大差异，最短者３天，最长者达２９天；给药方式以注射剂为主，包括肌肉注射、皮下注射和腹腔注射，也包括灌胃或饮水给药等方式。第三，对于氢化可的松造模小鼠后证候的评判指标不统一，主要涉及小鼠外观表现、体重、体温、免疫学指标、血液激素等。最后，对氢化可的松抑制肾上腺皮质轴的分
【参考文献】

相关期刊论文 前8条

1 吕颖坚;黄俊明;蔡玟;李晨悦;张大超;胡元华;李志;黄建康;;氢化可的松对小鼠免疫功能低下模型的建立及其验证[J];毒理学杂志;2013年03期

2 吕颖坚;黄俊明;蔡玟;黄琼;黄建康;李文立;陈壁锋;胡帅尔;;环磷酰胺和氢化可的松建立免疫抑制模型方法比较[J];卫生研究;2012年06期

3 沈自尹;;中西医结合肾本质研究回顾[J];中国中西医结合杂志;2012年03期

4 刘欣;张冰;刘小青;崔一然;;氢化可的松诱导大鼠类阳虚状态的动态观察[J];中华中医药杂志;2011年01期

5 方肇勤;潘志强;卢文丽;刘小美;管冬元;梁超;;大鼠/小鼠证候及辨证论治方法学的探索与发展[J];上海中医药大学学报;2008年04期

6 方肇勤;潘志强;卢文丽;刘小美;侯俐;廖明娟;;大鼠、小鼠常见证候计量化辨证方法的建立及其评价[J];中国中医基础医学杂志;2007年07期

7 方肇勤;潘志强;卢文丽;付晓伶;陈晓;汤伟昌;阚卫兵;许敏;;小鼠常见证候的辨证标准[J];中国中医基础医学杂志;2006年07期

8 彭国瑞;许志奇;杨学海;楚延;潘定彬;;不同糖皮质激素所致“阳虚”动物模型的实验研究[J];中医杂志;1984年04期

【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 雷志强;张丁;杨琼秀;鲁波勇;韩莉;王德成;;肺炎克雷伯菌ST23型流行株小鼠肺炎模型的建立[J];中华微生物学和免疫学杂志;2018年03期

2 朱文雄;杨晶;袁轶峰;刘涛;;贺菊乔教授辨治特发性少弱畸形精子症经验[J];南京中医药大学学报;2017年02期

3 宋莹;郭雅娟;黄铭倩;梁金强;黄芝瑛;;不同因素对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠模型效果的影响[J];实验动物与比较医学;2017年01期

4 童骏峰;徐志伟;杨元宵;陈宜涛;陈红淑;周小杰;李昌煜;;腺嘌呤与氢化可的松所致大鼠肾阳虚证模型比较研究[J];中华中医药杂志;2015年11期

5 贾丽娜;康学智;;从“肾藏精”看维生素D与多囊卵巢综合征的关系[J];中华中医药杂志;2015年11期

6 范青生;邹思思;张琳琳;余宙;;富硒北虫草增强免疫功能[J];南昌大学学报(理科版);2015年05期

7 张炎广;;阳和汤治疗肾阳虚哮喘体会[J];中医临床研究;2015年28期

8 王东建;苏励;王骁;曲环汝;茅建春;顾军花;丁之江;周珺;;不同体质MRL/lpr狼疮鼠B淋巴细胞刺激因子及其受体基因及蛋白质的表达[J];北京中医药大学学报;2015年09期

9 张奎;张翻过;赵小博;王春玲;;温阳利水法配合糖皮质激素治疗肾病综合征的临床体会[J];大家健康(学术版);2015年17期

10 王东建;曲环汝;王骁;茅建春;顾军花;丁之江;周珺;苏励;;不同体质MRL/lpr狼疮鼠病情程度及卵巢激素水平的变化[J];上海中医药大学学报;2015年04期

【二级参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 刘丹丹;郑丰渠;苗明三;;大枣多糖对氢化可的松致小鼠免疫抑制模型免疫功能的影响[J];中医学报;2011年07期

2 苑晓娟;樊卫平;张凯;刘玲玲;彭霞;谢艳云;;小剂量环磷酰胺对正常小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞的调节作用[J];免疫学杂志;2011年04期

3 胡帅尔;黄俊明;李文立;陈壁锋;黄建康;王凤岩;;溶血空斑分析仪在抗体形成细胞检测中的应用[J];毒理学杂志;2010年06期

4 金锐;林茜;刘森茂;赵茜;张倩;张冰;;基于数学方法的中医“阳虚证”与临床文献中客观指标的关联分析[J];中西医结合学报;2010年07期

5 齐丽娟;宋雁;王伟;崔文明;张馨;刘兆平;孙拿拿;李宁;;用环磷酰胺建立小鼠免疫抑制动物模型[J];卫生研究;2010年03期

6 沈自尹;黄建华;吴斌;董竞成;张新民;陈伟华;;淫羊藿激活内源性干细胞及其机制研究[J];中国中西医结合杂志;2009年03期

7 李有贵;吕志强;钟石;王红芬;计东风;;桑椹素对氢化可的松致老龄阳虚模型小鼠的影响[J];蚕业科学;2008年03期

8 李屹;何立群;;肾阳虚大鼠模型的水通道蛋白1改变[J];中西医结合学报;2008年05期

9 方笋;王萌;赵晓娟;陈根林;魏伟;;芍芪多苷对迟发型变态反应小鼠细胞免疫功能的影响[J];中国药理学通报;2008年04期

10 刘小美;方肇勤;潘志强;卢文丽;舒适;宋丽娜;;两种配方高脂饲料致高脂血症大鼠的证候比较[J];安徽中医学院学报;2008年02期

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 皋聪,王传社,巫冠中,屠鹏飞;苁蓉总苷对氢化可的松致肾阳虚小鼠学习记忆功能的影响[J];中国中医基础医学杂志;2005年05期

2 桂方晋;;大豆提取物和人参与某些药物的相互作用[J];国外医药(植物药分册);2004年03期

3 ;氢化可的松对血脂及实验性动脉粥样硬化的影响[J];武汉医学院学报;1976年04期

4 刘建新,周青,周俐,连其深,黄贤华,赖飞,叶和杨;不同剂量臭牡丹根对大鼠佐剂性关节炎不同时点的干预效应:与氢化可的松相比较[J];中国临床康复;2005年19期

5 马骏,任远,崔祝梅,姜晓霞;红芪多糖对氢化可的松所致免疫抑制模型小鼠T淋巴细胞亚群的影响[J];甘肃中医学院学报;2003年03期

6 云彩麟,崔正芳;桑门-9对氢化可的松引起的大鼠骨钙磷等减少的影响[J];中国民族医药杂志;1999年S1期

7 辛洪涛,靳长俊,林殿杰,张敏,牟晓燕,王贞;芪丹颗粒剂对大鼠肺纤维化的干预作用:与氢化可的松比较(英文)[J];中国临床康复;2005年31期

8 牛建昭;贲长恩;王德福;;当归补血汤加味对氢化可的松所致大鼠肝损伤保护作用的研究[J];中医药信息;1986年01期

9 刘振中;曹丹燕;睢罡;朱光华;唐小江;;红景天口服液对氢化可的松致阳虚模型大鼠保护作用初步研究[J];川北医学院学报;2011年01期

10 王钦富;;三种免疫学方法对氢化可的松抑制效应的评价[J];大连大学学报;1991年03期

相关硕士学位论文 前5条

1 刘晓晖;红景天苷对大鼠睾丸间质细胞和吊尾应激小鼠睾酮分泌的影响及药动学研究[D];河北医科大学;2009年

2 赵冉;高剂量丹参注射液诱发外周血管内皮细胞损伤机制的研究[D];辽宁中医药大学;2016年

3 魏莉;宿主免疫抑制对青蒿琥酯抗日本血吸虫作用的影响及日本血吸虫成虫自发荧光研究[D];苏州大学;2009年

4 丰佃娟;不同剂量葡萄籽提取物对过氧化损伤动物模型及人体抗氧化功能影响的研究[D];山东大学;2008年

5 王旭东;纳米钙补肾中药对骨质疏松大鼠髋关节骨与肌肉的影响[D];中国医科大学;2009年

本文编号：2857191