D-氨基半乳糖诱导的非人灵长类动物急性肝衰竭模型的建立

发布时间：2020-10-28 01:54

　　 目的探讨不同剂量D-氨基半乳糖(D-Gal)对非人灵长类动物食蟹猴的影响并建立不同程度急性肝衰竭(ALF)猴模型。方法将12只食蟹猴分为3组,每组4只,分别为低剂量组、中剂量组和高剂量组,给药剂量分别为0.23、0.25、0.27 g/kg。各组动物均在清醒状态(无麻醉)下,将相应剂量的D-Gal溶液经前臂静脉一次性注射入猴体内。记录猴的存活时间,观察是否出现消化道症状和肝性脑病症状。分别于给药前0 h,给药后12、24、36、48、60、72、96、120、144 h测量生命体征,留取血标本检测丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、凝血酶原时间(PT)、血氨等指标。取肝脏组织行苏木素-伊红(HE)染色观察病理学改变。结果低剂量组猴全部存活,仅出现一过性肝损伤,无肝性脑病症状,给药后60 h,肝功能和凝血指标达峰值,后逐渐恢复,120 h后基本恢复正常;中剂量组猴病程进展稍缓,在出现严重肝功能损伤及肝性脑病症状后逐渐恢复,仅1只死亡;高剂量组猴均出现肝性脑病症状后死亡,存活时间(72±13)h,肝功能严重受损。肝组织病理学检查示,低剂量组肝组织散在肝细胞坏死,炎症细胞浸润;中、高剂量组可见肝小叶结构不清,肝细胞片状坏死伴有明显出血。结论中、高剂量组均符合ALF模型标准,中剂量组ALF程度较轻,有利于肝移植手术等实验的开展;高剂量组ALF程度较重,适用于相关治疗方案疗效评价。
【部分图文】：

第1期黄一鸣等．D-氨基半乳糖诱导的非人灵长类动物急性肝衰竭模型的建立·53·A～D图分别为3组ALT、TB、血氨、PT随时间变化的趋势。与低剂量组比较，aP<0.05；与中剂量组比较，bP<0.05图1不同剂量组血清指标的比较Figure1ComparisonofserumindexesamongdifferentdosegroupsABCDABCDA~D图分别为正常肝组织、低剂量组、中剂量组、高剂量组的肝组织病理学图片图2不同剂量组猴肝组织的病理学图片（HE,×400）Figure2Histopathologicalpicturesoflivertissueofmonkeysindifferentdosegroups药物模型是应用肝毒性药物诱导ALF的发生，其中D-Gal是一种选择性肝毒性药物[11-12]，其所诱导的ALF模型有着症状与病毒性肝衰竭相似[13]、肝外毒性孝操作较便捷等优点而被广泛认可。其作用机制主要为两方面：一方面D-Gal在肝脏通过半乳糖途径代谢，通过抑制尿嘧啶核苷代谢，导致RNA和蛋白质合成受阻，引起肝细胞坏死；另一方面通过内毒素血症途径造成肝细胞损伤[14]。本次实验通过对食蟹猴进行训练，直接通过前臂静脉给药，避免既往颈内静脉给药的手术风险，消除了麻醉药物的不良反应[8,15-16]。D-Gal药理毒理研究发现，其半数致死量区间范围孝安全范围较窄。故本次研究给药剂量间隔设定为0.02g/kg，更精确地控制造模给药范围。结果发现除低剂量组只是出现一过性肝损伤，而中、高剂量组猴给药后的临床表现、生化指标及病理学结果均表明该模型与人类ALF疾病特征具有一致性。中、高剂量组均表现出ALT、TB进行性升高趋势，ALT峰值较基础值最高可达48倍，TB最高可达24倍，反映了肝脏发生严重损伤，肝细胞坏死。研?

第1期黄一鸣等．D-氨基半乳糖诱导的非人灵长类动物急性肝衰竭模型的建立·53·A～D图分别为3组ALT、TB、血氨、PT随时间变化的趋势。与低剂量组比较，aP<0.05；与中剂量组比较，bP<0.05图1不同剂量组血清指标的比较Figure1ComparisonofserumindexesamongdifferentdosegroupsABCDABCDA~D图分别为正常肝组织、低剂量组、中剂量组、高剂量组的肝组织病理学图片图2不同剂量组猴肝组织的病理学图片（HE,×400）Figure2Histopathologicalpicturesoflivertissueofmonkeysindifferentdosegroups药物模型是应用肝毒性药物诱导ALF的发生，其中D-Gal是一种选择性肝毒性药物[11-12]，其所诱导的ALF模型有着症状与病毒性肝衰竭相似[13]、肝外毒性孝操作较便捷等优点而被广泛认可。其作用机制主要为两方面：一方面D-Gal在肝脏通过半乳糖途径代谢，通过抑制尿嘧啶核苷代谢，导致RNA和蛋白质合成受阻，引起肝细胞坏死；另一方面通过内毒素血症途径造成肝细胞损伤[14]。本次实验通过对食蟹猴进行训练，直接通过前臂静脉给药，避免既往颈内静脉给药的手术风险，消除了麻醉药物的不良反应[8,15-16]。D-Gal药理毒理研究发现，其半数致死量区间范围孝安全范围较窄。故本次研究给药剂量间隔设定为0.02g/kg，更精确地控制造模给药范围。结果发现除低剂量组只是出现一过性肝损伤，而中、高剂量组猴给药后的临床表现、生化指标及病理学结果均表明该模型与人类ALF疾病特征具有一致性。中、高剂量组均表现出ALT、TB进行性升高趋势，ALT峰值较基础值最高可达48倍，TB最高可达24倍，反映了肝脏发生严重损伤，肝细胞坏死。研?
【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 曾艳丽;高飞;魏君峰;侯环荣;靳秀;丁岗强;殷辉;尚佳;康谊;;血栓弹力图评价慢加急性肝衰竭患者的凝血功能及预后研究[J];中华肝脏病杂志;2017年01期

2 María Jesús Tuón;Marcelino Alvarez;Jesús M Culebras;Javier González-Gallego;;An overview of animal models for investigating the pathogenesis and therapeutic strategies in acute hepatic failure[J];World Journal of Gastroenterology;2009年25期

【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 孙纷纷;郑嵘炅;孙丽华;鲁晓擘;张跃新;;人工肝支持系统治疗肝衰竭疗效的荟萃分析[J];中华临床感染病杂志;2015年05期

2 Kazutaka Yoshida;Yusuke Ushida;Tomoko Ishijima;Hiroyuki Suganuma;Takahiro Inakuma;Nobuhiro Yajima;Keiko Abe;Yuji Nakai;;Broccoli sprout extract induces detoxification-related gene expression and attenuates acute liver injury[J];World Journal of Gastroenterology;2015年35期

3 Li-Na Gao;Kuo Yan;Yuan-Lu Cui;Guan-Wei Fan;Yue-Fei Wang;;Protective effect of Salvia miltiorrhiza and Carthamus tinctorius extract against lipopolysaccharide-induced liver injury[J];World Journal of Gastroenterology;2015年30期

4 刘祥忠;邹志强;王贵强;李栋;邵志英;;人脐带间充质干细胞移植肝硬化大鼠肝脏miRNA的差异表达[J];中国组织工程研究;2015年23期

5 Jian-ping LI;Yan GAO;Shi-feng CHU;Zhao ZHANG;Cong-yuan XIA;Zheng MOU;Xiu-yun SONG;Wen-bin HE;Xiao-feng GUO;Nai-hong CHEN;;Nrf2 pathway activation contributes to anti-fibrosis effects of ginsenoside Rg1 in a rat model of alcoholand CCl_4-induced hepatic fibrosis[J];Acta Pharmacologica Sinica;2014年08期

6 张海燕;明奕;刘小盾;臧传宝;迟令龙;李栋;;脐带间充质细胞输注治疗大鼠肝硬化模型后表达谱的变化[J];中华肝脏病杂志;2014年07期

7 乐玮琳;方峰;;儿童暴发性肝衰竭机制研究进展[J];中国实用儿科杂志;2014年03期

8 史苇;吴意;程杰;;血清前白蛋白、γ-谷氨酰基转肽酶在肝衰竭诊断中应用价值的探讨[J];实用预防医学;2012年12期

9 陈拥华;杜冰清;陆燕蓉;刘续宝;麦刚;;急性肝功能衰竭大动物模型研究进展[J];华西医学;2011年02期

10 郝彦琴;赵龙凤;贾因棠;陈杰;;骨髓间充质干细胞对急性肝衰竭大鼠肠源性内毒素血症的保护作用[J];中国药物与临床;2010年07期

【二级参考文献】

相关期刊论文 前5条

1 ;Enhanced expressions and activations of leukotriene C4synthesis enzymes in D-galactosamine/lipopolysaccharide-induced rat fulminant hepatic failure model[J];World Journal of Gastroenterology;2008年17期

2 ;TypeⅠinositol 1, 4, 5-triphosphate receptors increase in kidney of mice with fulminant hepatic failure[J];World Journal of Gastroenterology;2007年16期

3 ;Functional evaluation of a new bioartificial liver system in vivo and in vivo[J];World Journal of Gastroenterology;2006年08期

4 ;Porcine acute liver failure model established by two-phase surgery and treated with hollow fiber bioartificial liver support system[J];World Journal of Gastroenterology;2005年35期

5 ;A rat model for acute hepatic failure[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2003年03期

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 黄一鸣;王励;李进军;张毅;陈文捷;杨扬;;D-氨基半乳糖诱导的非人灵长类动物急性肝衰竭模型的建立[J];器官移植;2019年01期

2 魏振年;发展我国非人灵长类动物实验之浅见[J];上海实验动物科学;2003年01期

3 田朝阳;杨守凯;;非人灵长类动物在医学科学实验中的应用[J];中国比较医学杂志;2009年06期

4 郑宏毅;郑永唐;;非人灵长类动物:免疫学基础研究到临床应用的桥梁[J];中国免疫学杂志;2018年08期

5 江鹏亮;汤球;余琛琳;崔淑芳;;非人灵长类动物模型在医学研究中的应用概况[J];实验动物科学;2010年06期

6 郑元元,孙兰;阿尔采末病非人灵长类动物模型[J];中国药理学通报;2005年06期

7 郭志儒;新发现2种可能由非人灵长类动物传播给人的反转录病毒[J];中国兽医学报;2005年05期

8 林志;崔岚;黄瑛;张頔;杨艳伟;吕建军;屈哲;霍桂桃;黄芝瑛;李波;;非人灵长类动物主要免疫器官及免疫细胞的研究进展[J];中国药理学与毒理学杂志;2013年04期

9 李晓燕;卢选成;武桂珍;;非人灵长类动物感染性实验生物风险分析[J];中国公共卫生管理;2011年05期

10 王琦;陈瑛;欧阳兆和;吴纯启;张有志;王晓菲;王全军;;非人灵长类动物模型在药物成瘾研究中的应用进展及意义[J];中国新药杂志;2018年08期

相关博士学位论文 前2条

1 于长清;HIV-1跨种传播限制性和易感非人灵长类动物模型初步研究[D];中国农业科学院;2010年

2 徐玉振;非人灵长类动物急性肝功能衰竭模型的建立[D];南方医科大学;2010年

相关硕士学位论文 前5条

1 占敏;切除85%肝与药物诱导大鼠急性肝衰竭模型的对比研究[D];南昌大学;2009年

2 杨蓉蓉;Caspase-1介导糖原合酶激酶-3β促进D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导的小鼠急性肝衰竭肝损伤[D];山西医科大学;2016年

3 吴海聪;一种新型化学损伤性大鼠肝纤维化模型的建立[D];福建医科大学;2016年

4 檀家俊;白介素1受体拮抗剂纳米缓释颗粒联合骨髓间充质干细胞移植治疗猪急性肝衰竭的实验研究[D];南京大学;2012年

5 蔡俊龙;中国西南地区猕猴感染内阿米巴的分子流行病学调查[D];复旦大学;2012年

本文编号：2859392