BMP-2对ECV304细胞增殖迁移及血管生成的影响

发布时间：2020-11-03 01:59

　　 目的研究骨形态发生蛋白2(BMP-2)对人脐静脉内皮细胞(ECV304细胞)增殖迁移及血管生成的影响。方法构建慢病毒表达载体并转染ECV304细胞,根据ECV304细胞中BMP-2的表达量不同,实验分为Normal组、LV-SH-BMP-2组和Overexpression-LV-BMP-2组。CCK-8、划痕实验、Western blot和成管实验检测ECV304细胞的增殖能力、迁移能力、血管生成相关蛋白表达量和血管生成能力;共培养后细胞注入裸鼠右侧腋窝皮下建立皮下移植瘤模型,观察移植瘤的生长情况及微血管密度(MVD)。结果 Overexpression-LV-BMP-2组ECV304细胞的增殖能力、迁移能力、血管生成相关蛋白的表达量和血管生成数量显著高于Normal组和LV-SH-BMP-2组,差异有统计学意义(P 0. 05);体内实验显示Overexpression-LV-BMP-2组ECV304细胞组移植瘤体积、质量和MVD较Normal组和LV-SH-BMP-2组明显增加,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论 BMP-2可促进ECV304细胞增殖迁移及血管生成。
【部分图文】：

图1ECV304细胞中BMP-2mＲNA与蛋白的表达及ECV304细胞的增殖能力A、B:ECV304细胞中BMP-2mＲNA与蛋白的表达;C:各组ECV304细胞的增殖能力;1:Normal组;2:LV-SH-BMP-2组;3:Overexpression-LV-BMP-2组;与Normal组比较:＊＊P＜0.01图2ECV304细胞的迁移能力×1001:Normal组;2:LV-SH-BMP-2组;3:Overexpression-LV-BMP-2组;与Normal组比较:＊＊P＜0.01Normal组(0.76±0.11)比较，Overexpression-LV-BMP-2组ECV304细胞在72h的增殖能力(1.43±0.19)增高(P＜0.05)，LV-SH-BMP-2组ECV304细胞在72h的增殖能力(0.49±0.10)降低(P＜0.05)，3组间差异有统计学意义(F=326.5，P＜0.05)。见图1C。2．4ECV304细胞迁移能力划痕实验结果:Nor-mal组、Overexpression-LV-BMP-2组、LV-SH-BMP-2组ECV304细胞划痕愈合率为(40±4)%、(74±4)%、(11±7)%，3组间差异有统计学意义(F=119.1，P＜0.01)。与Normal组比较，Overexpres-sion-LV-BMP-2组ECV304细胞迁移能力增高(P＜0.01)，LV-SH-BMP-2组ECV304细胞迁移能力降低(P＜0.01)，差异有统计学意义。见图2。2．5血管生成Normal组、Overexpression-LV-BMP-2组和LV-SH-BMP-2组ECV304细胞血管数量分别为(9.32±0.97)、(19.37±0.9)、(1.66±1.73)，3组间差异有统计学意义(F=70.88，P＜0.01)。与Normal组比较:LV-SH-BMP-2组及Over-expression-LV-BMP-2组差异均有统计学意义(P＜0.01)。见图3A。2．6微血管密度与Normal组MVD(31.28±1.95)相比，Overexpression-LV-BMP-2组小鼠肿瘤组织中的MVD(

图1ECV304细胞中BMP-2mＲNA与蛋白的表达及ECV304细胞的增殖能力A、B:ECV304细胞中BMP-2mＲNA与蛋白的表达;C:各组ECV304细胞的增殖能力;1:Normal组;2:LV-SH-BMP-2组;3:Overexpression-LV-BMP-2组;与Normal组比较:＊＊P＜0.01图2ECV304细胞的迁移能力×1001:Normal组;2:LV-SH-BMP-2组;3:Overexpression-LV-BMP-2组;与Normal组比较:＊＊P＜0.01Normal组(0.76±0.11)比较，Overexpression-LV-BMP-2组ECV304细胞在72h的增殖能力(1.43±0.19)增高(P＜0.05)，LV-SH-BMP-2组ECV304细胞在72h的增殖能力(0.49±0.10)降低(P＜0.05)，3组间差异有统计学意义(F=326.5，P＜0.05)。见图1C。2．4ECV304细胞迁移能力划痕实验结果:Nor-mal组、Overexpression-LV-BMP-2组、LV-SH-BMP-2组ECV304细胞划痕愈合率为(40±4)%、(74±4)%、(11±7)%，3组间差异有统计学意义(F=119.1，P＜0.01)。与Normal组比较，Overexpres-sion-LV-BMP-2组ECV304细胞迁移能力增高(P＜0.01)，LV-SH-BMP-2组ECV304细胞迁移能力降低(P＜0.01)，差异有统计学意义。见图2。2．5血管生成Normal组、Overexpression-LV-BMP-2组和LV-SH-BMP-2组ECV304细胞血管数量分别为(9.32±0.97)、(19.37±0.9)、(1.66±1.73)，3组间差异有统计学意义(F=70.88，P＜0.01)。与Normal组比较:LV-SH-BMP-2组及Over-expression-LV-BMP-2组差异均有统计学意义(P＜0.01)。见图3A。2．6微血管密度与Normal组MVD(31.28±1.95)相比，Overexpression-LV-BMP-2组小鼠肿瘤组织中的MVD(

1)。与Normal组比较，Overexpres-sion-LV-BMP-2组ECV304细胞迁移能力增高(P＜0.01)，LV-SH-BMP-2组ECV304细胞迁移能力降低(P＜0.01)，差异有统计学意义。见图2。2．5血管生成Normal组、Overexpression-LV-BMP-2组和LV-SH-BMP-2组ECV304细胞血管数量分别为(9.32±0.97)、(19.37±0.9)、(1.66±1.73)，3组间差异有统计学意义(F=70.88，P＜0.01)。与Normal组比较:LV-SH-BMP-2组及Over-expression-LV-BMP-2组差异均有统计学意义(P＜0.01)。见图3A。2．6微血管密度与Normal组MVD(31.28±1.95)相比，Overexpression-LV-BMP-2组小鼠肿瘤组织中的MVD(57.20±2.01)增加(P＜0.01)，LV-SH-BMP-2组小鼠肿瘤组织中的MVD(15.53±3.82)降低(P＜0.01)，3组间差异有统计学意义(F=361.5，P＜0.01)。见图3B。图3三组ECV304细胞血管数量及MVD1:Normal组;2:LV-SH-BMP-2组;3:Overexpression-LV-BMP-2组;与Normal组比较:＊＊P＜0.012．7血管生成相关蛋白的表达Westernblot结果显示:Overexpression-LV-BMP-2组ECV304细胞内·491·安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2019Feb;54(2)
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