rALR对大鼠单个核细胞作用的初步研究

发布时间：2020-11-07 17:47

　　 目的：基于在体内实验中所发现的rALR在免疫调节方面的相关现象，我们在体外实验中进一步观察rALR在免疫调节中的可能作用，并初步探讨其相关机制。 方法：分离大鼠脾单个核细胞，在体外予ConA刺激，并于刺激同时或先后给予rALR，以~3H-TdR掺入法检测单个核细胞的增殖，以放免法检测培养上清中IL-2分泌情况，以AnnexinV法检测细胞凋亡。分离原代成年Wistar大鼠和新生Wistar大鼠肝细胞，收集传代培养的QGY、HK2细胞，以冻融方式制备四种细胞膜抗原；分离SD大鼠脾单个核细胞，以不同量抗原体外刺激单个核细胞，于不同时间点收集细胞以~3H-TdR检测细胞增殖。并计算各时点刺激组与对照组掺入值之比，作为刺激指数。在刺激同时或终止培养前的48h给予CsA或rALR，于相应时间点收集细胞检测细胞增殖。 结果：rALR对ConA的促淋巴细胞增殖在5-100ug／ml的浓度范围内有抑制作用，呈量效依赖关系，在30ug／ml达50％抑制，100ug／ml达最大抑制。ConA预先活化单个核细胞10、32h后，给予30ug／ml rALR可产生明显抑制作用。30ug／ml(ID_(50))的rALR30h预处理不影响单个核细胞对ConA刺激的反应能力。ConA+rALR组的IL-2分泌在24h明 重庆医科大学硕士学位论文 显低于conA组。rALR(30ug/ml)组的早期凋亡率与总凋亡率在4、 14、30、54h均与对照组无显著性差异。Co叭+rALR(30ug/m1)组在14h、 3Oh的早期凋亡低于ConA组，但30h的总凋亡率高于ConA组。浓度 为10ou留ml、30ug/m1的rALR分别以不同程度抑制了成年肝细胞抗原 和川丈2抗原刺激的反应细胞增殖。对于HKZ、原代成年大鼠肝细胞抗 原的预先刺激，终止培养前的48h加入的两种浓度的rALR均抑制了反 应细胞的增殖。 结论:rALR在体外能以剂量依赖性地抑制ConA和特异性抗原诱 导的大鼠脾单个核细胞增殖，抑制ConA诱导的IL一2的分泌，这种抑 制作用与凋亡可能没有直接关系。未经抗原激活的免疫细胞可能不表 达ALR受体。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2004
【中图分类】：R392
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rALR 对大鼠脾单个核细胞作用的初步研究
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本文编号：2874276