毛囊上皮细胞对Hedgehog信号的响应与短期毛发再生无关

发布时间：2020-11-15 17:21

　　 背景:Hedgehog信号通路对于多种组织的发育、动态平衡以及修复起了重要的作用,前人的研究强调了Hedgehog信号对于毛发模式形成是至关重要的。目的:探究Hedgehog信号在成年后的毛囊上皮动态平衡中发挥的作用。方法:Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2小鼠、Smofl/fl小鼠与K14-CreER小鼠均来自TheJacksonLaboratory,实验经上海交通大学实验动物伦理与使用委员会批准,批准号为1602028。①首先利用Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2小鼠特异地标记Lgr5+细胞亚群,确认了在Lgr5+毛囊上皮干细胞/前体细胞中多个Hedgehog信号通路成员高度富集表达。而后用Lgr5-EGFP-Ires-CreERT2小鼠与Smofl/fl小鼠交配得到了Lgr5-EGFP-Ires-CreERT2;Smofl/fl小鼠;在刚进入第二轮长静息期的P49天进行背部剃毛,接着用他莫昔芬诱导Hedgehog信号通路的介导蛋白Smo敲除,观察在Lgr5+细胞中敲除Smo对毛发再生速度的影响;之后实验在P50-54天他莫昔芬诱导Smo敲除后1周进行脱毛,进一步评估bulge上皮干细胞在突变小鼠的功能是否有变化;②用K14-Cre ER小鼠与Smofl/fl小鼠交配以得到K14-CreER; Smofl/fl小鼠,同上实验方法,在毛囊整个上皮细胞这一更大范围内用他莫昔芬诱导敲除Smo,观察是否有毛发再生障碍及毛囊Bulge干细胞功能障碍。结果与结论:Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2; Smofl/fl小鼠模型及K14-CreER; Smofl/fl小鼠模型中均没有观测到明显的毛发再生障碍,毛囊Bulge干细胞也没有受到影响。说明Lgr5+细胞群和整个毛囊上皮对于Hedgehog信号通路的响应与毛囊静息期向生长期转换以及短期的毛发再生无关,且与bulge上皮干细胞的维持也无关。这一发现强调了组织发育和动态平衡之间的不同分子机制,为人们更加准确地理解毛囊再生和组织生长的机制提供了重要依据。
【文章目录】：
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文题释义:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 设计
    1.2 时间及地点
    1.3 材料
    1.4 方法
        1.4.1 小鼠模型和小鼠他莫昔芬给药
        1.4.2小鼠脱毛模型的建立
        1.4.3 组织学分析
        1.4.4 流式分选
        1.4.5 RNA抽提和Real-time PCR
    1.5 主要观察指标
2 结果Results
    2.1 Lgr5+细胞中高表达Hedgehog信号通路成员
    2.2 Lgr5+细胞对于Hedgehog信号的响应并不影响毛囊静息期-生长期转换
    2.3 毛囊上皮基底层细胞对于Hedgehog信号的响应与毛囊静息期-生长期转换无关
3 讨论Discussion

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本文编号：2885004