乙肝病毒核心蛋白病毒样颗粒表面抗原密度对抗体应答水平的影响

发布时间：2020-11-20 05:39

　　 【目的】为了探究乙肝病毒核心蛋白(HepatitisBviruscoreprotein,HBc)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)表面抗原密度对免疫后抗体应答水平的影响,制备了不同抗原密度的HBc VLPs疫苗,并检测了其在小鼠体内的抗体应答水平。【方法】首先制备了N端带有3个甘氨酸的人巨细胞病毒重组抗原域AD-4作为模式抗原,接着通过Sortase A的介导将AD-4连接到HBc VLPs表面上。将系列浓度梯度AD-4抗原在SortaseA介导下分别与相同浓度的HBcVLPs发生反应,制备不同抗原密度的HBc-AD-4 VLPs。将其分别免疫6–8周龄BALB/c小鼠3次,每次免疫间隔2 w,间接ELISA法检测被免疫小鼠血清的抗体应答水平。【结果】结果表明,当HBc VLPs表面抗原密度为44.4%时,即HBc反应浓度∶AD-4反应浓度为1:0.5时,不足以引起高滴度的抗体产生;当HBc VLPs表面抗原密度为64.2%时,即HBc反应浓度∶AD-4反应浓度为1:1时,HBc-AD-4 VLPs诱导的AD-4特异性抗体滴度与100%抗原密度的HBc-AD-4VLPs所引起的抗体滴度相当;当HBcVLPs表面抗原密度大于64.2%时,引起的抗体应答水平不因抗原密度增加而进一步增强。【结论】发现了HBcVLPs表面抗原密度与免疫后抗体滴度呈正相关,然而免疫64.2%抗原密度的HBc VLPs所产生的抗体滴度可达峰值,抗原密度进一步增加,抗体应答水平不会进一步加强。
【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 主要试剂:
        1.1.2 实验动物:
    1.2 蛋白表达与纯化
    1.3 蛋白转肽反应体系的配制
    1.4 动物分组与免疫
    1.5 间接ELISA法检测免疫后小鼠抗血清效价
    1.6 统计分析
2 结果和分析
    2.1 蛋白表达与纯化
    2.2 不同抗原密度的病毒样颗粒的确定
    2.3 不同抗原密度的病毒样颗粒的制备
    2.4 免疫小鼠的抗体应答
3 讨论

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本文编号：2891031