RTCA与MTT法用于检测肠道微生物细胞毒性的比较研究

发布时间：2020-12-03 02:32

　　目的运用实时细胞分析（RTCA）法和MTT法检测干酪乳杆菌（L.casei）、肠出血性大肠杆菌（EHEC）的细胞毒性,并比较两者优缺点。方法将L.casei及EHEC的菌液、菌体裂解液（MOI=200）以及上清液（25%）感染HT-29和LoVo细胞,经RTCA法和MTT法观察细菌对细胞的校正细胞指数（NCI）及细胞活力的影响。结果 RTCA法与MTT法结果一致,L.casei的活菌、菌体裂解液对HT-29细胞和LoVo细胞无明显毒性。EHEC的活菌对HT-29细胞和LoVo细胞有明显毒性,其菌体裂解液对HT-29细胞有明显毒性、对LoVo细胞无明显毒性。在上清液实验中,RTCA法检测出L.casei和EHEC对HT-29细胞无明显毒性,而LoVo细胞受培养基影响未能正确反映出上清液细胞毒性结果。结论与MTT法相比,RTCA法更适于细菌细胞毒性检测,但应在实验前选择合适的细胞系及种植浓度,建议在选用RTCA法检测细胞毒性时选择两种或两种以上细胞系,多方验证以避免漏检。 

【文章来源】：军事医学. 2019年06期 第442-447页 北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验试剂
    1.2 实验仪器
    1.3 细胞
    1.4 细菌
    1.5 实验材料准备
    1.6 MTT法检测细胞毒性
    1.7 细胞种植实验
    1.8 RTCA法检测细胞毒性实验
    1.9 统计分析
2结果
    2.1 MTT实验结果
    2.2 RTCA实验结果
        2.2.1细胞种植实验
        2.2.2菌体细胞毒性实验结果
        2.2.3菌体裂解液细胞毒性实验结果
        2.2.4上清液细胞毒性实验结果
3讨论



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