尾加压素Ⅱ通过ERK1/2途径诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和上调Egr-1表达
发布时间:2020-12-05 00:37
目的:研究不同浓度尾加压素Ⅱ(UⅡ)及其受体拮抗剂urantide对培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响,探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径及早期生长反应因子1(Egr-1)在UⅡ诱导大鼠PASMCs增殖中的作用。方法:以组织贴块法原代培养大鼠PASMCs:(1)采用Brd U掺入实验测定不同浓度(1μmol/L、0.1μmol/L和0.01μmol/L)UⅡ及其受体拮抗剂对大鼠PASMCs增殖的影响;(2)采用real-time PCR检测UⅡ及其受体拮抗剂对细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、应激活化蛋白激酶(SAPK)、p38 MAPK及Egr-1mRNA表达的影响;(3)采用Western blotting检测UⅡ、urantide及ERK1/2抑制剂PD98059对PASMCs磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、p-SAPK、p-p38 MAPK和Egr-1蛋白表达的影响。结果:(1)UⅡ在一定浓度范围(1μmol/L、0.1μmol/L和0.01μmol/L)呈浓度依赖性地促进肺动脉平滑肌细胞增殖(P<0.01或P<0.05),这种增殖...
【文章来源】:中国病理生理杂志. 2014年11期 第2093-2097页 北大核心
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
材料和方法
1 动物
2 主要试剂
3 主要方法
3.1 大鼠PASMCs的培养及免疫荧光鉴定
3.2 Brd U掺入实验
3.3 Real-time PCR
3.4 Western blotting分析
4 统计学处理
结果
1培养大鼠PASMCs鉴定
2 UⅡ对培养大鼠PASMCs增殖的影响
3不同浓度UⅡ、urantide及PD98059对大鼠PASMCs ERK1/2、SAPK、p38 MAPK和Egr-1mRNA表达的影响
4 不同浓度UⅡ及urantide及PD98059对大鼠PASMCs p-ERK1/2、p-SAPK、p-p38 MAPK和Egr-1 蛋白表达的影响
讨论
本文编号:2898540
【文章来源】:中国病理生理杂志. 2014年11期 第2093-2097页 北大核心
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
材料和方法
1 动物
2 主要试剂
3 主要方法
3.1 大鼠PASMCs的培养及免疫荧光鉴定
3.2 Brd U掺入实验
3.3 Real-time PCR
3.4 Western blotting分析
4 统计学处理
结果
1培养大鼠PASMCs鉴定
2 UⅡ对培养大鼠PASMCs增殖的影响
3不同浓度UⅡ、urantide及PD98059对大鼠PASMCs ERK1/2、SAPK、p38 MAPK和Egr-1mRNA表达的影响
4 不同浓度UⅡ及urantide及PD98059对大鼠PASMCs p-ERK1/2、p-SAPK、p-p38 MAPK和Egr-1 蛋白表达的影响
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