鼠层粘蛋白α5链G结构域基因的克隆和表达的研究

发布时间：2020-12-06 23:43

　　层粘蛋白不仅是细胞外基质的主要结构分子，也是重要的信号分子。层粘蛋白与Ⅳ型胶原蛋白构成网状的细胞外基质结构，赋予组织以韧性、弹性、保水性及对机械力的缓冲性，并为细胞提供生存及从事活动的微环境。层粘蛋白在控制细胞的增殖、参与细胞的迁移、控制细胞分化、促进创伤修复等方面起传递信号的作用。目前在哺乳动物体内发现12种层粘蛋白，每种层粘蛋白都是由α、β和γ构成的三聚体，共有5种α链，3种β链和2种γ链。鼠的层粘蛋白的α5链在成年组织中广泛表达，被认为是鼠体内的主要的α链，α5链上的G结构域是其重要的功能域，层粘蛋白的许多的生物功能与其密切相关。 本实验采用RT-PCR技术，应用高保真DNA聚合酶成功的从小鼠肾脏中扩增出α5链G结构域的E3、LG4、LG5三个基因片段。将PCR产物直接酶切回收，连接到原核表达载体pET-28a（+），构建了pET-28a-E3、pET-28a-LG4和pET-28a-LG5三个表达载体。把重组质粒转化入表达受体菌BL21，经IPTG诱导后都获得了表达，且都以包涵体的表达形式存在，用SDS-PAGE和Western-blot的方法对重组蛋白进行了鉴定。将包涵... 

【文章来源】：中国人民解放军军需大学吉林省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
第一部分 前言
第二部分 研究内容
    实验一 鼠层粘蛋白α5链E3、LG4、LG5 cDNA的克隆表达及多抗的制备
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 实验流程
            1.3 方法
        2 结果与讨论
        3 小结
    实验二 鼠层粘蛋白α5链E3、E8片段在毕赤酵母细胞中的表达
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 实验流程
            1.3 方法
        2 结果与讨论
        3 小结
结论
参考文献
致谢
英文摘要
个人简历



本文编号：2902208