体外诱导人类诱导性多能干细胞分化为造血干/祖细胞的研究

发布时间：2020-12-07 00:48

　　本研究探讨体外诱导人诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem cell,iPSC）分化为造血干/祖细胞的能力。在体外用小鼠骨髓基质细胞OP9与人类iPSC共培养的方法,将iPSC诱导分化为造血干/祖细胞;用流式细胞术检测造血干/祖细胞表面标志物的表达水平;用实时定量PCR检测分化过程中iPSC及造血干/祖细胞的相关基因mRNA表达水平的变化;用免疫磁珠法分离CD34+造血干/祖细胞并进行半固体集落形成实验检测细胞的集落形成能力。结果表明,iPSC与OP9细胞共培养诱导造血分化的第4天即可观察到iPSC形态变化;流式细胞术检测显示,分化得到的细胞表达已知的造血干/祖细胞相关表面标志物CD34和CD43分子。在体外分化过程中多能性的标志基因Oct4的表达逐渐下降,造血相关转录因子Gata-2的表达逐渐升高,而Runx-1的表达量则呈波浪式变化,CD34表达量逐渐升高。集落培养14 d能够得到红系集落（CFU-E）,粒系集落（CFU-G）,巨核系集落（CFU-M）,粒-巨核系集落（CFU-GM）和混合系集落（CFU-GEMM）。结论:iPSC细胞能够在体外通过与OP... 

【文章来源】：中国实验血液学杂志. 2014年01期 第136-141页 北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材料和方法
    细胞株来源
    主要试剂和仪器
    细胞培养
    i PSC细胞与OP9 细胞共培养
    CD34+细胞的免疫磁珠法分选
    集落形成实验
    RNA提取和c DNA逆转录及Q-PCR
结果
    细胞的培养与形态观察
    诱导造血分化
    流式细胞术检测
    Q-PCR检测
    CD34+细胞集落形成实验
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Expansive effects of aorta-gonad-mesonephros-derived stromal cells on hematopoietic stem cells from embryonic stem cells[J]. FU Jin-rong, LIU Wen-li, ZHOU Yu-feng, ZHOU Jian-feng, SUN Han-ying, LUO Li, ZHANG Heng and XU Hui-zhen Department of Hematology, Tongji Hospital, Tongji Medical School, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China.  Chinese Medical Journal. 2005(23)



本文编号：2902305