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β—半乳糖苷酶EA、ED融合蛋白的表达及初步功能研究

发布时间:2020-12-10 09:42
  酶免疫分析技术自1971年创立以来,已广泛用于生物标记物的检测。酶免疫分析技术的质量依赖于抗原的纯度、抗体的特异性、合适标记酶的选用,其灵敏度取决于标记酶的高度纯化和高转化率。利用基因工程生产诊断用酶,使酶的纯度大大提高,产量及质量均较自然来源酶好,简化了制备程序,大大促进了酶免疫分析技术的发展。 大肠杆菌的β-半乳糖苷酶,因人血浆中缺乏此酶,并具有大量易得的底物,被用于均相及非均相免疫分析,是目前最常用的标记酶之一。Henderson等人在1986年利用基因工程技术生产大肠杆菌β-半乳糖苷酶酶受体(EA)和酶供体(ED),并利用其α-互补功能创立了克隆酶供体免疫分析(CEDIA)技术。β-半乳糖苷酶的EA、ED这种α-互补性还被用于分子生物学、蛋白质相互作用的监控、表达免疫分析等方面的研究。 实验目的 利用pGEX-4T-2融合蛋白表达系统制备重组β-半乳糖苷酶EA/ED蛋白,并对其活性进行研究,为进一步研究CEDIA开发新的试剂盒和利用β-半乳糖苷酶的α-互补特性进行表达免疫分 析等打下基础。 实验方法 ... 

【文章来源】:浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:54 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
一、 摘要
    中文摘要
    英文摘要
二、 正文
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    参考文献
三、 综述 免疫分析新技术的研究进展
四、 致谢



本文编号:2908480

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