靶向caspase-8小发夹RNA减轻去血清/缺氧诱导的人骨髓间充质干细胞凋亡~

发布时间：2020-12-11 03:06

　　目的:研究caspase-8小发夹RNA（Cap8 shRNA）对人骨髓间充质干细胞（hMSCs）凋亡的调控作用。方法:构建2个靶向人caspase-8基因的穿梭质粒pAd-Cap8 shRNA,并鉴定可有效抑制人HEK293细胞中caspase-8表达的pAd-Cap8 shRNA质粒。构建表达Cap8 shRNA的重组腺病毒质粒,并在HEK293细胞中包装、扩增重组腺病毒rAd-Cap8 shRNA。检测rAd-Cap8 shRNA感染的hMSCs中caspase-8 mRNA和蛋白表达。利用annexin V/PI双染色法和caspase-8活性检测分析去血清/缺氧诱导的hMSCs凋亡变化,利用荧光定量PCR检测hMSCs中VEGF、肝细胞生长因子1（HGF）、胰岛素样生长因子（IGF-1）、Bcl-2和Bcl-xL mRNA表达。结果:通过定量PCR筛选到可有效抑制caspase-8表达的pAd-Cap8 shRNA质粒。成功构建Cap8 shRNA的重组腺病毒质粒,并包装、扩增重组腺病毒rAd-Cap8 shRNA。荧光定量PCR和Western blotting结果证实rA... 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2014年07期 第1172-1178页 北大核心

【文章页数】：7 页


本文编号：2909791