TLR2及TLR4在巨噬细胞识别非结核分枝杆菌中的作用研究

发布时间：2017-04-08 04:13

  本文关键词：TLR2及TLR4在巨噬细胞识别非结核分枝杆菌中的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)能逃避巨噬细胞的吞噬作用,而后在细胞内存活下来。机体的固有免疫系统在识别病原体的时候,Toll样受体家族发挥重要的作用,结核分枝杆菌感染机体后,巨噬细胞中TLR2及TLR4以及一些细胞因子都对MTB有免疫调节,递呈抗原的作用。同时,分枝杆菌又能反过来调节TLR2及TLR4的表达,若持续刺激TLRs,机体就会产生负反馈调节,使结核分枝杆菌在机体内长期存活。近年来,非结核分枝杆菌得到了人们的广泛关注,与非结核分枝杆菌相关的研究也越来越多,但是关于Toll样受体如何通过巨噬细胞发挥抗非结核免疫作用的研究还相对较少。本文先介绍实验设计及处理方法。针对非结核分枝杆菌感染,采用了流式细胞术检测了RAW264.7细胞在0h、4h、12h、24h、48h、72h的凋亡及TLR4的表达量,用荧光定量PCR技术检测RAW264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞在不同时间点TLR2及TLR4的m RNA的变化水平,用ELISA技术检测了不同时间点TNF-α的表达量变化并与对照组相比。通过制作病理切片以及抗酸染色切片,观察了感染非结核结核分枝杆菌后的小鼠肺和脾的病理变化以及菌体分布情况。结果显示:浅黄分枝杆菌和新金分枝杆菌感染均可促进RAW264.7细胞凋亡,并上调RAW264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞的TLR2,TLR4以及RAW264.7细胞中TNF-α的表达水平,表达量在4h时表达量达到最高,且差异显著(P0.05)。TLR2及TLR4基因上调水平与TNF-α的上调水平呈现出正相关性变化。感染非结核分枝杆菌的小鼠的肺及脾与生理盐水对照组相比具有一定的病理变化。初步推测浅黄分枝杆菌和新金分枝杆菌可刺激RAW264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞的TLR2及TLR4的表达水平上调,并影响RAW264.7细胞中TNF-α的表达。而且新金分枝杆菌的毒力要强于浅黄分枝杆菌的毒力。目前,对非结核分枝杆菌的相关研究越来越多,本文中提到的检测方法及实验结果可为今后的试验及研究提供理论依据和参考。我们也可以通过对TLR2及TLR4的深入了解,寻找以与TLRs相关的抗非结核药物,可能成为当前治疗非结核病的一种选择,并对非结核病的预防与治疗有重要意义。
【关键词】：非结核分枝杆菌 巨噬细胞 TLR2 TLR4
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R378.911
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-9
• 第一篇 文献综述9-19
• 第一章 非结核分枝杆菌9-12
• 1.1 非结核分枝杆菌概述9
• 1.2 非结核分枝杆菌的致病性9
• 1.3 非结核分枝杆菌的免疫致病机制9-10
• 1.4 非结核分枝杆菌病的流行趋势10-11
• 1.5 非结核分枝杆菌病的诊疗11-12
• 第二章 结核分枝杆菌与巨噬细胞的凋亡12-15
• 2.1 结核分枝杆菌与巨噬细胞间的相互作用12-13
• 2.2 结核分枝杆菌对巨噬细胞凋亡的影响13
• 2.3 结核分枝杆菌抑制巨噬细胞凋亡的机制13-15
• 第三章TLR2 及TLR4 在巨噬细胞识别结核分枝杆菌中的作用15-19
• 3.1 TLR2 及TLR4 的抗原识别作用15-16
• 3.2 TLR2/TLR4 在巨噬细胞识别结核分枝杆菌感染中的作用16-19
• 第二篇 研究内容19-57
• 第一章 浅黄分枝杆菌及新金分枝杆菌对RAW264.7 细胞的凋亡、TLR2、TLR4 及TNF的影响19-38
• 1.1 材料19-20
• 1.2 方法20-25
• 1.3 结果25-35
• 1.4 讨论35-37
• 1.5 小结37-38
• 第二章 浅黄分枝杆菌及新金分枝杆菌对C57BL/6 小鼠巨噬细胞内TLR2 及TLR4 表达的影响38-57
• 2.1 材料38-39
• 2.2 方法39-41
• 2.3 结果41-56
• 2.4 讨论56
• 2.5 小结56-57
• 结论57-58
• 参考文献58-65
• 作者简介65-66
• 致谢66

【参考文献】

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1 Ruth Br銉ring;J銉rg F. Schlaak;;The Role of the Innate Immune System of the Liver in the Control of HBV and HCV[J];Virologica Sinica;2008年02期

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本文编号：292044