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重组人GST-PD-1融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达及其生物学特性的研究

发布时间:2020-12-19 00:50
  B7-CD28超家族是最具特征的共刺激分子家族,不仅提供重要的正性共刺激信号(B7-1/B7-2-CD28,ICOSL-ICOS)起始和维持T细胞针对抗原的免疫应答,而且也提供负性共刺激信号(B7-1/B7-2-CTLA-4,PD-L1/PD-L2-PD-1)下调和终止T细胞介导的免疫应答。PD-1分子属于CD28家族,是55KDa的Ⅰ型跨膜糖蛋白,胞外区包含一个IgV样结构域。此结构域及胞外段的糖基化被认为在与配体的结合中发挥重要的作用。一系列的研究表明,PD-1通过与其两个配体PD-L1和PD-L2的作用而抑制T、B细胞的活化及细胞因子的产生,在维持机体的外周耐受发挥至关重要的作用。PD-1也参与了一系列疾病的发病。对小鼠的肿瘤和移植排斥模型的体外和体内的研究表明,PD-1可作为肿瘤、自身免疫性疾病和移植排斥中有效的治疗靶点。但是迄今为止,尚无商品化高纯度的PD-1重组蛋白,限制了它的实验研究和临床实验。本实验克隆了PD-1的全长和胞外段基因,并且首次在大肠杆菌中大规模的表达,继而进一步纯化了GST-PD-1融合蛋白,并建立了一个鉴定其生物学活性的方法,为以后的PD-1及相关分子实... 

【文章来源】:苏州大学江苏省

【文章页数】:59 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

重组人GST-PD-1融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达及其生物学特性的研究


PD一L一PD--l途径对体内T、B细胞激活的负调控模式

示意图,表达质粒,示意图


PD一1胞外段cnNA的Rl’-pcR结果

酶切图,重组表达质粒,DNA序列分析,质粒


重组表达质粒(pGEx一sx一3一PD一1)PcR和酶切结果

【参考文献】:
硕士论文
[1]仿刺参铜锌超氧化物歧化酶(Aj-SOD1)的功能及性质分析[D]. 车明月.大连工业大学 2017
[2]TAT-MT融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达、纯化及体外活性初步测定[D]. 刘皓熙.暨南大学 2011



本文编号:2924929

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