人乳腺癌细胞cDNA 表达文库构建及特异性抗原基因筛选

发布时间：2020-12-22 10:06

　　目的： 20世纪90年代以来，多种人类肿瘤抗原基因克隆的成功，大大推动了肿瘤免疫学理论的发展，也促进了肿瘤免疫诊断和免疫治疗的应用。由于肿瘤抗原在肿瘤诊断与治疗中具有重要的靶向作用，以及在肿瘤的发生和发展的基础研究中的重要作用，因此寻找特异性强、基因功能和生化机理明确的靶分子成为肿瘤学、生物学的研究热点。近年来，乳腺癌的发病率日趋增高，在乳腺癌特异抗原标志的众多研究中，除c-erbB-2的特异性较高外，一直未有新的特异性和灵敏度较高的乳腺癌抗原的报道。本研究针对我院前期制备的一株乳腺癌单克隆抗体（M4G3），利用cDNA文库的构建和筛选技术，完成了此乳腺癌特异抗原基因的克隆与表达，为此抗体的临床应用及进一步阐明乳腺癌发生、发展机制提供了可靠的依据。 方法： 第一部分：复苏M4G3杂交瘤细胞，体外培养，小鼠腹腔注射，进行单克隆抗体的大量制备；复苏T47D等四种乳腺癌细胞，体外培养，爬片，应用M4G3进行免疫细胞化学实验；四种细胞收集，应用M4G3进行Western-blot染色。 第二部分：以λgt11为载体构建乳腺癌细胞T47D的cDNA表达文库；对构建的文库进... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

丽春红染色结果图l.llw匕stemBlot结果

从右图可见电泳显示285、185两条带清晰、位置正确，RNA完整性好，未降解。(图2.1)100图2.1总RNA电泳二、mRNA的提取(见图2.2)将上述高质量RNA样本合并后，采用磁珠法提取mRNA，琼脂糖凝胶电泳34

cDNA电泳(图2.4)

【参考文献】：
期刊论文
[1]乳腺癌单链抗体制备及其在荷人乳腺癌裸鼠中的放免显像[J]. 牛瑞芳,常克力,朱殿清,庞雁.  中国肿瘤临床. 2001(10)
[2]隐性乳腺癌的全乳腺次连续大切片检查[J]. 牛昀,范宇,傅西林.  中华肿瘤杂志. 1995(04)



本文编号：2931576